【摘 要】
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为了阐明microRNA对猪产仔数的调节机制,采用CRISPR/Cas9技术构建针对猪miR-136的基因编辑表达载体。通过实验,在miR-136基因成熟区及其下游设计两个单链引导RNA（sgRNA）,合成4
【机 构】
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贵州大学农业生物工程研究院,贵州大学动物科学学院
【基金项目】
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国家高技术研究发展计划(863计划)课题(2013AA102503);贵州省农业攻关项目(黔科合NY[2013]3073号);贵州省“百”层次创新型人才项目(黔科合人才2016-4012号);国家自然科学基金(31672390)
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为了阐明microRNA对猪产仔数的调节机制,采用CRISPR/Cas9技术构建针对猪miR-136的基因编辑表达载体。通过实验,在miR-136基因成熟区及其下游设计两个单链引导RNA（sgRNA）,合成4条磷酸化的单链DNA寡核苷酸,复性后形成两条带粘性末端的双链寡核苷酸片段,插入线性化的载体pX462的BpiI酶切位点处,转化感受态大肠杆菌DH5α,经测序确认,得到两个编辑表达载体pX462-miR-136-1和pX462-miR-136-2。构建了两个编辑miR-136基因的表达载体,为猪繁殖力的
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