探讨N-乙酰半胱氨酸(NAC)抑制急性创伤性脊髓损伤(SCI)后细胞凋亡的作用机制。

选取清洁级成年雄性健康Sprague Dawley大鼠54只，完全随机分为单纯椎板切除组(Sham组)、急性SCI对照组(SCI组)和NAC组，各18只。Sham组单纯行T_9～10椎板切除术；SCI组利用悬线法分离后使用显微剪完全横断脊髓建立大鼠T_9～10脊髓损伤的急性SCI模型；NAC组在SCI组基础上于伤后30 min、12 h经腹腔注射150 mg/kg NAC，2次/d，连续7 d。在造模后的第24小时，每组分别取12只断头处死，使用原位末端转移酶标记(TUNEL)染色(6只)观察凋亡细胞，蛋白质免疫印迹实验(6只)观察抗凋亡的B淋巴细胞瘤-2蛋白(Bcl-2)、促凋亡的Bcl-2相关X蛋白(Bax)的表达情况。每组剩6只继续饲养至第8周。分别于伤后1、2、4、6、8周行大鼠脊髓损伤(BBB)评分和斜坡实验评价神经功能。

TUNEL染色结果显示，SCI组和NAC组TUNEL阳性细胞数多于Sham组[(95.0±3.0)、(72.0±2.6)个比(0.0±0.0)个]，差异均有统计学意义(F＝2 763.375，P<0.01)。蛋白质印迹实验结果显示，3组均有Bcl-2和Bax表达。SCI组和NAC组Bcl-2表达相对灰度均低于Sham组[(0.225±0.025)、(0.798±0.042)比(1.000±0.071)]，NAC组Bcl-2表达相对灰度高于SCI组(均P<0.01)；SCI组和NAC组Bax表达相对灰度高于Sham组[(4.59±0.34)、(3.22±0.23)比(1.00±0.16)]，NAC组Bax表达相对灰度低于SCI组(均P<0.01)。BBB评分结果显示，在第1、2、4、6、8周，SCI组和NAC组BBB评分均低于Sham组[0(0，0)、1(0，1)分比21(21，21)分，(1.3±0.5)、(2.7±0.8)分比(21.0±0.0)分，(3.5±1.1)、(7.0±1.4)分比(21.0±0.0)分，(5.3±1.8)、(9.3±2.1)分比(21.0±0.0)分，(7.8±1.5)、(12.5±1.4)分比(21.0±0.0)分]，NAC组BBB评分高于SCI组(均P<0.05)。SCI组和NAC组组内第1、2、4、6、8周BBB评分比较，差异均有统计学意义(均P<0.01)。斜坡实验显示，在第1、2、4、6、8周，SCI组和NAC组斜坡角度均低于Sham组[(16.0±2.6)°、(18.3±2.6)°比(78.3±3.4)°，(18.7±2.6)°、(21.3±3.2)°比(78.0±3.6)°，(22.3±3.3)°、(30.0±4.1)°比(77.7±3.3)°，(27.8±2.9)°、(38.8±2.8)°比(78.8±2.6)°，(30.5±2.9)°、(44.8±3.4)°比(78.5±3.3)°]，在第4、6、8周NAC组斜坡角度高于SCI组(均P<0.05)。SCI组和NAC组组内第1、2、4、6、8周斜坡角度比较，差异均有统计学意义(均P<0.01)。

NAC可能通过降低大鼠脊髓损伤区组织中促凋亡基因Bax的表达及增强抗凋亡基因Bcl-2的表达而发挥神经保护作用。