大肠杆菌亮氨酰—tRNA合成酶与tRNA^Lcu的相互作用头孢菌素酰化酶的表达、翻译后加工和亚基重组

来源 :中国科学院研究生院学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:davidcao2008
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第一部分:为得到大量的大肠杆菌tRNA1^Leu和tRNA2^Leu,研究tRNA与亮氨酰-tRNA合成酶(LeuRS)的相互作用,用基因克隆的方法高表达并纯化了它们;测定了接受活力和被LeuRS催化的动力学常数;改进了RNA体外转录必需的T7RNA聚合酶的纯化方法,优化了转录条件,转录序列比文献值高10倍。用体外转录方法得到了各种在接受茎突变的tRNALeu变种,研究了一个在CP1结构域插入40个氨基酸残基的变种LeuRS-A对tRNA^Leu2种等受体的识别,证明了tRNA1^Leu和tRNA2^Le
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