【摘 要】
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目的 探讨肝细胞特异性敲除HuR基因对小鼠肝脏功能的影响.方法 从美国Jackson实验室引进LoxP标记的人抗原R(human antigen R,HuR)基因小鼠(HuRfl/fl)和Alb-Cre转基因小鼠.杂
【机 构】
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温州医科大学附属第一医院 肝胆外科,浙江 温州 325015温州医科大学附属第二医院,超声影像科,浙江 温州325027;温州医科大学附属第二医院,肝胆外科,浙江 温州325027;温州医科大学附属康
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目的 探讨肝细胞特异性敲除HuR基因对小鼠肝脏功能的影响.方法 从美国Jackson实验室引进LoxP标记的人抗原R(human antigen R,HuR)基因小鼠(HuRfl/fl)和Alb-Cre转基因小鼠.杂交后,经数代选育配种,建立肝细胞特异性HuR基因敲除小鼠(HuRLKO)模型.PCR技术鉴别小鼠基因型,蛋白免疫印迹和免疫荧光实验检验小鼠肝脏的HuR表达水平,同时HE染色观察肝脏结构变化.高脂喂养HuRfl/fl/Alb-Cre和HuRfl/fl两组小鼠,观察小鼠体重、肝重和肝体比变化,提取血清检测肝脏损伤和脂肪代谢相关指标.结果 PCR成功检测筛选子代小鼠基因型,包括HuRfl/fl/Alb-Cre和HuRfl/fl小鼠.蛋白免疫印迹实验和免疫荧光实验证明小鼠肝细胞特异性HuR基因敲除成功.HE染色结果提示HuRLKO小鼠的肝细胞出现变性水肿、局部坏死.高脂喂养实验提示两组小鼠在肝重、肝体比、AST、ALT、HDL-C、血糖上的差异具有统计学意义(P0.05).结论 HuR基因是维持小鼠肝细胞功能的必要基因,Cre-LoxP技术可成功构建HuRLKO小鼠模型,且特异性高,表型明显,为研究HuR在肝脏各项疾病的发生发展中所扮演的角色,提供了一个很好的疾病模型.
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