流动注射法测定血红蛋白与过氧化物酶对H2O2/愈创木酚反应体系的动态催化性能

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辣根过氧化物酶(HRP)已被广泛应用于各个领域,但其价格昂贵且不易保存,所以寻找一种可替代HRP的模拟酶意义重大.本研究初步选择血红蛋白(Hb)作为模拟酶,利用流动注射光度系统(SP-FIA),在非平衡状态下对比了Hb与HRP对H2O2/愈创木酚(GA)反应的动态催化性能.结果表明:Hb在弱酸性及高温环境下其稳定性强于HRP;Hb对H2O2/GA反应体系的催化作用符合米氏方程,可作为一种过氧化物模拟酶使用;在动力学研究中发现,Hb对GA和H2O2的催化活性不及HRP,对GA的亲和力强于HRP,对H2O2的亲和力弱于HRP.干扰实验表明,Hb的催化性能可被Co2+、Cu2+、Pb2+、Fe3+、Zn2+激活;EDTA和抗坏血酸可抑制Hb,柠檬酸的酸性环境利于Hb催化;EDTA、抗坏血酸及柠檬酸均能抑制HRP.
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