【摘 要】
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通过RT-PCR扩增得到了人G蛋白偶联受体激酶5(G Protein-coupled receptor kinase, GPK5)的基因,将其克隆到表达载体pET-28a中,并将该质粒转入大肠杆菌BL21(DE3),在10 μmol/L
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通过RT-PCR扩增得到了人G蛋白偶联受体激酶5(G Protein-coupled receptor kinase, GPK5)的基因,将其克隆到表达载体pET-28a中,并将该质粒转入大肠杆菌BL21(DE3),在10 μmol/L异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPIG)诱导培养下表达,通过分离纯化,得到部分纯化的GRK5蛋白.体外活性测定表明,纯化后的GPK5能够特异性地磷酸化视紫红质.动力学常数Km=4.3 μmol/L,Vmax=25 nmol/(mg*min),与文献报道的从真核表达系统中纯化
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