探讨川芎嗪对长波紫外线(UVA)诱导人皮肤成纤维细胞(HDF)衰老的拮抗作用及对基质金属蛋白酶(MMP)-1和MMP-3 mRNA表达的影响。
方法酶消化法分离HDF进行原代培养,用不同浓度川芎嗪分别作用UVA多次照射前后的HDF。CCK-8法检测川芎嗪作用24、48、72 h或川芎嗪预处理24 h进行多次UVA照射的各组HDF体外增殖情况。光学显微镜下观察经多次UVA照射的各组细胞形态变化及β半乳糖苷酶染色情况,实时荧光定量PCR检测各组细胞内MMP-1和MMP-3 mRNA相对表达量。
结果浓度为20、50 mg/L的川芎嗪作用HDF 24、48、72 h对细胞的体外增殖活性无促进或抑制作用,但100 mg/L作用48 h对HDF出现短暂抑制作用,与未给药组比较细胞增殖活性差异有统计学意义(P< 0.05)。20、50、100 mg/L的川芎嗪预处理HDF 24、48、72 h对经多次UVA照射的HDF体外增殖均有一定的促进作用,各组间细胞增殖活性在3个时间点差异有统计学意义(F值分别为17.451,15.231,23.535,均P< 0.01)。多次UVA照射后HDF形态出现体积变大、颗粒增加及β半乳糖苷酶表达增加等衰老现象,接近复制性衰老的HDF(P55组)。而20、50、100 mg/L的川芎嗪预处理HDF 24 h可减轻这种衰老现象,其中UVA组β半乳糖苷酶阳性率(68.417 ± 1.181)%,UVA+川芎嗪20 mg/L组(58.167 ± 5.620)%,UVA+川芎嗪50 mg/L组(45.167 ± 5.502)%,UVA+川芎嗪100 mg/L组(43.000 ± 2.000)%,未照射组(33.667 ± 5.865)%,P55组(76.000 ± 6.557)%,各组间差异有统计学意义(F= 45.918,P< 0.01),且UVA+各浓度川芎嗪组、未照射组与UVA组比较差异有统计学意义(均P< 0.05)。川芎嗪可降低多次UVA照射诱导的HDF表达MMP-1和MMP-3 mRNA,且UVA+各浓度川芎嗪组、未照射组与UVA组比较差异有统计学意义(均P< 0.05)。
结论川芎嗪对多次UVA照射诱导的HDF衰老有拮抗作用,并能降低HDF衰老过程中MMP-1和MMP-3 mRNA的表达。