大鼠骨桥蛋白干扰质粒的构建及其干扰效率的鉴定

来源 :口腔颌面外科杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:jinhui4620
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目的:构建针对大鼠骨桥蛋白(osteopontin,OPN)基因的小干扰RNA(microRNA,miRNA)绿色荧光蛋白表达载体,并转染大鼠原代皮肤成纤维细胞后,通过半定量RT-PCR法对其干扰效率进行鉴定,从而筛选出最佳的干扰序列。方法:体外化学合成大鼠OPN序列特异性pre-miRNA双链(OPNi-1,OPNi-2及OPNi-3)和非特异性对照双链OPNi-3M,并分别将退火后的双链克隆至线性质粒表达载体pcDNATM6.2-GW/EmGFP-miR。经测序验证后,脂质体介导转染293T细胞进行真
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