PCR条件对扩增SARS-CoV多聚酶部分基因的影响

来源 :生物技术 | 被引量 : 0次 | 上传用户：chanstan

【摘要】

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目的:对该实验室已建立的检测SARS冠状病毒多聚酶基因的套式RT-PCR方法进行优化.方法:从SARS病人的嗽口水标本中提取RNA,调整套式PCR的退火温度,扩增SARS冠状病毒多聚酶部分

【作者】

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赵卫晏辉钧张文炳方丹云周经姣胡琼龙北国江丽芳

【机构】

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第一军医大学热带军队卫生学系微生物学教研室,广州中山大学中山医学院微生物学教研室

【出处】

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生物技术

【发表日期】

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2003年6期

【关键词】

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PCR条件 SARS冠状病毒套式RT-PCR 退火温度非典型肺炎 SARS coronavirus (SARS-CoV) Nested RT-PCR Det

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目的:对该实验室已建立的检测SARS冠状病毒多聚酶基因的套式RT-PCR方法进行优化.方法:从SARS病人的嗽口水标本中提取RNA,调整套式PCR的退火温度,扩增SARS冠状病毒多聚酶部分基因.扩增出的阳性片段连接入pGEM-T载体中,测序后比较其与已知SARS冠状病毒的同源性.结果:通过改变PCR条件,成功从一SARS病人的嗽口水中扩增出SARS冠状病毒多聚酶部分基因.结论:针对不同标本优化PCR反应条件非常重要.

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