【摘 要】
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目的:探讨S100A6调控磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号通路对黑色素瘤细胞(A375)增殖、侵袭和迁移影响.方法:首先将A375细胞分为4组:空白对照组(正常培养)、空载体对照组(转染pcDNA3.0空载体质粒)、S100A6转染组(转染pcDNA3.0-S 100A6质粒)、S100A6转染+抑制剂组(转染pcDNA3.0-S 100A6质粒与PI3K抑制剂LY294002).采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测各组细胞S100A6 mRNA相对表达量;MTT法检测各组
【机 构】
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河北邯郸市第一医院颌面外科,邯郸056002;河北工程大学附属医院整形外科,邯郸056000
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目的:探讨S100A6调控磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号通路对黑色素瘤细胞(A375)增殖、侵袭和迁移影响.方法:首先将A375细胞分为4组:空白对照组(正常培养)、空载体对照组(转染pcDNA3.0空载体质粒)、S100A6转染组(转染pcDNA3.0-S 100A6质粒)、S100A6转染+抑制剂组(转染pcDNA3.0-S 100A6质粒与PI3K抑制剂LY294002).采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测各组细胞S100A6 mRNA相对表达量;MTT法检测各组细胞增殖活力;Transwell检测各组细胞侵袭能力;划痕线法检测各组细胞的迁移能力;western blotting检测A375各组细胞PI3K/Akt信号通路相关分子PI3K、p-PI3K、GSK3β、Akt、p-Akt蛋白及c-Myc、CyclinD1、MMP-2、MMP-9蛋白表达水平.结果:与空白对照组、空载体对照组相比,S100A6转染组细胞中S100A6mRNA表达水平显著升高(P＜0.05),细胞存活率、侵袭细胞数和迁移细胞数均显著增高(P＜0.05),细胞中p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt、GSK3β、c-Myc、CyclinD1、MMP-2、MMP-9蛋白表达水平均显著升高(P＜0.05);与S100A6转染组相比,S100A6转染+抑制剂组细胞中S100A6 mRNA表达水平无显著变化(P＞0.05),细胞存活率、侵袭细胞数和迁移细胞数均显著降低(P＜0.05),细胞中p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt、GSK3β、c-Myc、CyclinD1、MMP-2、MMP-9蛋白表达水平均显著降低(P＜0.05).结论:S100A6可促进黑色素瘤细胞A375增殖、侵袭和迁移,其机制可能是通过激活PI3K/Akt信号通路实现的.
其他文献
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目的:采用网络药理学的方法分析预测出地榆皂苷Ⅱ(Ziyuglycoside Ⅱ)治疗鼻咽癌(NPC)的相关作用靶点及通路,并通过实验进行验证.方法:通过Pubchem、Swiss Target Prediction、GeneCards等数据库查询获得地榆皂苷Ⅱ治疗鼻咽癌的相关作用靶点,并运用David数据库对靶点进行基因本体(GO)功能富集分析和京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析,最后构建出“药物—靶点—疾病—通路”关系网络模型图.通过CCK-8细胞毒性实验探究地榆皂苷Ⅱ对鼻咽癌5-8F细胞
目的:探究HIPK2短发夹RNA对口腔鳞癌SCC-25细胞株增殖、自噬和裸鼠移植瘤生长的影响.方法:将SCC-25分为未转染的Control组、转染shRNA-NC阴性对照载体的shRNA-NC组,转染HIPK2-shRNA1慢病毒载体的HIPK2-shRNA1组,转染HIPK2-shRNA2慢病毒载体的HIPK2-shRNA2组.RT-qPCR检测HIPK2 mRNA水平;克隆形成实验检测细胞克隆形成率;流式细胞仪检测细胞凋亡;western blotting检测HIPK2、c-Myc、Bax、Bcl-
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目的:探讨miR-29a调控骨形态发生蛋白2(BMP2)/矮小相关转录因子2(Runx2)在大鼠肋骨骨折愈合中的作用.方法:建立SD大鼠肋骨骨折模型,分为miR-29组和对照组,每组20只.14d和28d各处死动物10只,行X线和micro-CT检查,观察骨折愈合情况,分别采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法和western blotting法检测Runx2和BMP2 mRNA和蛋白表达水平.结果:X线摄片显示自14d开始两组均有骨痂开始形成,至28 d骨痂塑形改建,骨折愈合.与对照组相比,miR-