目的 观察神经节苷脂(GMI)对脊髓损伤后内质网应激介导凋亡的影响.方法 90只SD大鼠按随机数字表法分为假手术组、等渗盐水组和GM1组,每组30只.等渗盐水组和GM1组采用Allen法建立T10脊髓损伤动物模型,分别于伤后3h、1、3、7d时(每个时间点6只)应用改良Tarlov评分法评价其神经功能；应用Hochest33658染色检测神经细胞凋亡；荧光显微镜下观察内源性半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)-12、CHOP的表达.Western blot法检测内质网应激相关蛋白Caspase-12、CHOP的表达.进一步细胞水平STS(5μmol/L)诱导人神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y)细胞凋亡12h后加入GM1(0、20、50 mmol/L)孵育48 h,Western blot检测Caspase-12及CHOP表达；碘化丙锭(PI)/膜联蛋白V(Annexin V)-异硫氰酸荧光素(FITC)检测细胞凋亡率.结果 假手术组大鼠均未见明显瘫痪,等渗盐水组及GM1组出现不同程度的下肢功能障碍,且各时间点的Tarlov评分均低于假手术组(P＜0.01).与假手术组比较,等渗盐水组Caspase-12及CHOP表达水平分别为0.24±0.02及0.63±0.10,明显上调(P＜0.05),细胞凋亡率明显上调(P＜0.05)；与等渗盐水组比较GM1组Caspase-12及CHOP表达水平分别为0.13±0.01及0.43 ±0.07,均下调(P＜0.05),细胞凋亡率下调(P＜0.05)；GM1孵育后STS诱导的SH-SY5Y细胞凋亡率下降7.4±6.9(P ＜0.05),Caspase-12及CHOP表达水平下调(P＜0.05).结论 GM1通过下调Caspase-12及CHOP表达抑制了大鼠脊髓损伤后内质网应激介导的神经元凋亡。
神经节苷脂对大鼠脊髓损伤后内质网应激介导凋亡的抑制作用
【摘 要】
：
目的 观察神经节苷脂(GMI)对脊髓损伤后内质网应激介导凋亡的影响.方法 90只SD大鼠按随机数字表法分为假手术组、等渗盐水组和GM1组,每组30只.等渗盐水组和GM1组采用Allen法建立T10脊髓损伤动物模型,分别于伤后3h、1、3、7d时(每个时间点6只)应用改良Tarlov评分法评价其神经功能；应用Hochest33658染色检测神经细胞凋亡；荧光显微镜下观察内源性半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋
【机 构】
：
450003郑州,河南省人民医院重症医学科,450003郑州,河南省人民医院重症医学科,450003郑州,河南省人民医院重症医学科,450003郑州,河南省人民医院重症医学科,450003郑州,河南省
【出 处】
：
中华实验外科杂志
【发表日期】
：
2013年30期
论文部分内容阅读
其他文献
在肝脏外科中肝功能状态对肝切除术方案的选择和实施具有重要指导意义,所以术前对肝功能作精准评估甚为重要.但传统的静态生化检测以及以生化指标为基础的综合评分系统如Child-Pugh评分、MELD评分都不能够及时、准确反映肝脏的损害程度和储备功能情况,存在一定的局限性[1].而作为一种能动态评估肝储备功能的吲哚菁绿(ICG)排泄试验已被证实能够更加灵敏、准确和安全地定量评估肝切除术前肝脏储备功能.现介
期刊
目的 探讨缺氧诱导因子-2仅（HIF-2a）沉默对胃癌细胞株SGC7901凋亡的影响及其机制。方法常规培养SGC7901细胞，实时荧光定量聚合酶链反应（FQ—PCR）和Westernblot法检测低氧组（90％氮气＋5％氢气＋5％二氧化碳）和正常氧条件下HIF-2a、B淋巴细膨白血病-2（bel-2）、bcl-2相关x蛋白（bax）、半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶（Caspase）-3的表达；合成针
期刊
组织缺氧是慢性下肢缺血性疾病发生发展的重要原因,其分子机制尚不清楚[1].本研究旨在观察ECV304细胞缺氧环境下缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)及磷酸肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)信号通路的变化并探讨其意义.一、材料和方法1.细胞培养及活力分析:ECV304细胞缺氧处理采用混合气体(94％N2、5％CO2 、1％ O2)于RPMI 1640培养基中培养,噻唑蓝(MTT)比色法测定
期刊
我们以干细胞生长因子(HGF)和α-成纤维细胞生长因子(α-FGF)诱导大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)特定向肝细胞分化,为进一步通过干细胞移植治疗肝脏疾病提供依据.一、材料与方法1.大鼠BMSCs的分离和培养:通过动物实验伦理委员会的批准,4周龄SD大鼠被安置在浙江省东阳市人民医院的实验动物中心接收标准的饮食,健康SD大鼠麻醉处死后提取股骨和胫骨骨髓腔中的DMEM-LG冲洗液,细胞重悬液被转移
期刊
目的 探讨支气管肺泡腔等细胞外液中是否存在泛素蛋白酶体及其在急性肺损伤过程中的变化和作用机制.方法 应用大鼠肺挫伤模型研究急性肺损伤支气管肺泡腔内泛素蛋白酶体含量变化及其可能的病理生理作用.分别采用生化检测、酶联免疫吸附试验(ELISA)及Western blot等方法研究对照组及急性肺损伤组伤后6～168 h支气管肺泡灌洗液(BALF)中蛋白酶体20S亚基、泛素等含量及其活性.结果 急性肺损伤后
目的 探讨白藜芦醇(RES)对早期激素性股骨头坏死的预防作用及其机制.方法 Wistar大鼠54只,成组设计(n=18)为3组:模型对照组、RES组、空白对照组.模型对照组和RES组大鼠制成激素性股骨头坏死模型；后者于注射完成后当天开始连续7d给予RES.15只用于组织学检测,评价骨坏死率,行骨小梁容积分析,并用原位末端转移酶标记(TUNEL)法测定细胞凋亡；3只大鼠取双侧股骨头Western b
目的 建立大鼠高肺血流量肺动脉高压模型.方法 采取左颈总动脉-颈外静脉分流、左肺动脉结扎以及左颈总动脉-颈外静脉分流联合左肺动脉结扎3种手术方式建立大鼠高肺血流量模型,观察术后8周肺动脉平均压(mPAP)、右心室肥厚指数(RV/LV+S)、肺血管管壁厚度占血管外径的百分比(WT％)和管壁面积占血管总面积的百分比(WA％)；以及左颈总动静脉分流联合左肺动脉结扎术后4、8、12周上述指标的变化.结果
前列腺癌是欧美男性最常见肿瘤之一,居男性肿瘤死亡原因第2位,占男性因肿瘤死亡的比率约为9％.在亚洲,前列腺癌发病率虽然较欧美低,但是近10年来持续上升.前列腺癌已成为老年男性健康的严重威胁.虽然外科手术治疗或放射治疗可以治愈局限性前列腺癌,对于复发或转移的前列腺癌,去势治疗也可以取得较好的效果,但是这类患者往往会进展为激素抵抗型前列腺癌(CRPC).CRPC患者中位生存时间为16～21个月,化疗对
期刊
目的 探讨整合素β1和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)在胶质瘤组织的表达及意义.方法 应用免疫组织化学法检测50例胶质瘤组织和20例正常脑组织中整合素β1和MMP-9表达水平.结果 整合素β1在胶质瘤组织的表达率为42％(21/50),明显高于正常脑组织表达率5％(1/20),两者差异有统计学意义(P＜0.01),MMP-9在胶质瘤组织的表达率为72％(36/50),明显高于正常脑组织表达率[15
肿瘤靶向治疗是当前癌症治疗的研究热点,并代表着未来的发展方向.肿瘤细胞与正常细胞的主要区别有:持续的血管生成、无限制的增殖、侵袭和转移能力以及逃避凋亡[1].第2个线粒体衍生的胱天蛋白酶激活剂(Smac)是2000年由DU等[2]和Verhagen等[3]同时发现的1种蛋白.目前发现Smac蛋白在肿瘤中表达的变化可能通过影响细胞凋亡共同参与肿瘤的发生发展,例如在骨肉瘤和胃癌中[4-5].在外界刺激
期刊