【摘 要】
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目的:探讨补元汤对体外香烟烟雾提取物(CSE)诱导的L6大鼠成肌细胞(L6细胞)凋亡、增殖及自噬的干预效应及机制.方法:构建CSE诱导L6细胞损伤的体外模型,实验分为对照组、模型组、补元汤组.对照组常规培养,模型组加入20％CSE诱导,补元汤组加入20％CSE及1/500补元汤.流式细胞术检测细胞凋亡及细胞周期分布;CCK8法检测细胞活力;Western blot检测微管相关蛋白1轻链3(LC3)、BCL2/腺病毒E1B 19kDa结合蛋白1(Bnip-1)、自噬相关基因7(Atg7)、p62、磷脂酰肌醇
【机 构】
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江西中医药大学,南昌330006;建德市中西医结合医院,建德311600;江西中医药大学附属医院,南昌330006
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目的:探讨补元汤对体外香烟烟雾提取物(CSE)诱导的L6大鼠成肌细胞(L6细胞)凋亡、增殖及自噬的干预效应及机制.方法:构建CSE诱导L6细胞损伤的体外模型,实验分为对照组、模型组、补元汤组.对照组常规培养,模型组加入20％CSE诱导,补元汤组加入20％CSE及1/500补元汤.流式细胞术检测细胞凋亡及细胞周期分布;CCK8法检测细胞活力;Western blot检测微管相关蛋白1轻链3(LC3)、BCL2/腺病毒E1B 19kDa结合蛋白1(Bnip-1)、自噬相关基因7(Atg7)、p62、磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、磷酸化磷脂酰肌醇3-激酶(p-PI3K)蛋白表达水平;透射电镜观察自噬体形成情况.结果:与对照组比较,模型组细胞凋亡率、细胞周期中S期细胞比例升高,进入G2/M期细胞比例降低,细胞活力降低,LC3-Ⅱ/Ⅰ、Atg7、Bnip-1、p-PI3K蛋白表达水平升高,p62蛋白表达水平降低,差异均具有统计学意义(P＜0.01),电镜观察到自噬体数量增多;与模型组比较,补元汤组细胞凋亡率、细胞周期中S期细胞比例降低,进入G2/M期细胞比例升高,细胞活力升高,LC3-Ⅱ/Ⅰ、Atg7、Bnip-1、p-PI3K蛋白表达水平降低,p62蛋白表达水平升高,差异均具有统计学意义(P＜0.01),电镜观察到自噬体数量减少.结论:补元汤可以抑制CSE诱导的L6细胞过度自噬作用,减少细胞凋亡、促进细胞增殖,对CSE诱导的L6细胞损伤具有保护作用,其机制可能与调节Ⅲ型PI3K信号通路有关.
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文章总结杭州宣氏儿科对小儿感冒后咳嗽病因病机的认识及中医临床辨证论治经验.宣氏儿科临床上认为,感冒后咳嗽,病机主要为外有风邪郁遏在表,内夹痰湿、内火、肝风、食积,病位主要在肺,但可伴有心、肝、脾胃脏腑功能失调.治法以疏风解表,宣肺利咽为主,同时重视兼夹症治疗.最后,应根据患儿不同体质进行预后调理,瘥后防复.文末附上病案分析一则.
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