评价沉默信息调节因子1(SIRT1)/叉头框蛋白3α(FoxO3α)信号通路在小檗碱预先给药减轻肝实质细胞缺氧复氧损伤中的作用。
方法培养AML12小鼠肝实质细胞，以1×106个/ml密度接种于6孔板(2 ml/孔)和96孔板(200 μl/孔)，采用随机数字表法分为4组(n＝36)：对照组(C组)常氧条件下(5%CO2-21%O2-74%N2)培养，缺氧复氧组(H/R组)、小檗碱预先给药组(BP组)及SIRT1-siRNA(SS组)缺氧(5%CO2-1%O2-94%N2)12 h、复氧条件下(5%CO2-21%O2-74%N2)培养6 h，SS组缺氧前24 h加入SIRT1靶向小干扰RNA(SIRT1-siRNA)，BP组和SS组缺氧前2 h加入小檗碱(终浓度5 μmol/L)。于复氧6 h时采用MTT法测定细胞活力，ELISA法测定MDA含量和SOD活性，流式细胞术检测细胞凋亡率，Western blot法检测SIRT1及FoxO3α表达，免疫沉淀法检测FoxO3α的乙酰化水平。
结果与C组比较，H/R组、BP组和SS组细胞活力降低，MDA含量升高，SOD活性降低，细胞凋亡率升高，SIRT1表达及FoxO3α核/胞浆比值增加，细胞核FoxO3α乙酰化水平升高(P<0.05)；与H/R组比较，BP组细胞活力升高，MDA含量降低，SOD活性升高，细胞凋亡率降低，SIRT1表达及FoxO3α核/胞浆比值增加，细胞核FoxO3α乙酰化水平升高(P<0.05)；与BP组比较，SS组细胞活力降低，MDA含量升高，SOD活性下降，细胞凋亡率升高，SIRT1表达及FoxO3α核/胞浆比值降低，细胞核FoxO3α乙酰化水平降低(P<0.05)。
结论小檗碱预先给药减轻缺氧复氧肝实质细胞损伤的机制与促进细胞SIRT1表达，抑制细胞核内FoxO3α乙酰化水平有关。