【摘 要】
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目的 rnc基因敲除后,观察变异链球菌的耐酸、耐氧化、耐高渗透压性能的改变及其可能的调节机制.方法 通过长链PCR连接诱变技术,构建rnc基因缺失突变株,分别对比突变菌株与野
【机 构】
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首都医科大学附属北京口腔医院牙体牙髓科,北京,100050四川大学华西口腔医院口腔预防科,口腔疾病研究国家重点实验室,四川 成都 610041;
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目的 rnc基因敲除后,观察变异链球菌的耐酸、耐氧化、耐高渗透压性能的改变及其可能的调节机制.方法 通过长链PCR连接诱变技术,构建rnc基因缺失突变株,分别对比突变菌株与野生菌株对氧化环境、酸性环境及高渗透压环境的耐受能力;采用real-time RT-PCR验证rnc缺失后变异链球菌环境耐受相关基因的转录水平表达变化.结果 rnc基因缺失后,变异链球菌的耐酸性(X2=13.464,P=0.001)及耐氧化性(X2=4.505,P=0.048)较野生菌株显著下降,但耐高渗透压性显著增加(X2=11.971,P=0.001).环境耐受相关基因luxS与ropA的表达水平显著下调(P<0.001),分别为野生菌株的0.64倍、0.51倍;而htrA与brpA的表达水平显著上调(P<0.001),分别为野生菌株的1.56倍、1.80倍.结论 rnc基因缺失影响变异链球菌环境耐受相关基因的表达,降低了变异链球菌耐酸、耐氧化能力,增强了对高渗透压的耐受能力.
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