【摘 要】
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目的建立新生小鼠肝细胞体外分离培养方法。方法采用胶原酶消化组织块法分离新生小鼠肝细胞,倒置显微镜动态观察细胞形态特征,并进行鉴定:PAS(period icac id-Sch iff,PAS)染
【机 构】
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华中科技大学同济医学院附属协和医院儿科,华中科技大学同济医学院附属协和医院普外科
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目的建立新生小鼠肝细胞体外分离培养方法。方法采用胶原酶消化组织块法分离新生小鼠肝细胞,倒置显微镜动态观察细胞形态特征,并进行鉴定:PAS(period icac id-Sch iff,PAS)染色观察细胞肝糖元的含量;免疫组化SP法检测细胞甲胎蛋白AFP(alpha fetal prote in,AFP)的表达;生化法检测肝细胞培养上清白蛋白的含量。结果肝组织块经用胶原酶直接消化,获得的肝细胞成活率达80%以上。肝细胞培养一周后长满瓶底,呈集落生长,融合成片。培养的肝细胞PAS糖原染色阳性;AFP表达阳性;培养上清白蛋白含量至培养5~7d时达峰值,随后又逐渐下降。结论胶原酶消化组织块法分离新生小鼠肝细胞,方法简单、高效,培养的原代肝细胞符合新生肝细胞的生物学特性。
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