氨基末端脑利钠肽的原核表达与纯化及稳定性研究

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目的从构建了人氨基末端脑利钠肽(aminoterm inal probrain natriuretic peptide,NTproBNP)基因的表达菌中抽取目的蛋白,并对其进行纯化、鉴定及稳定性的初步研究。方法取表达菌株BL21pGEX4T3NTproBNP,IPTG诱导表达,GSHagarose亲和纯化目的蛋白,提纯产物进行SDSPAGE电泳和Westernblot鉴定,并采用自动免疫分析仪检测其免疫反应性和稳定性。结果GSTNTproBNP融合蛋白表达水平高,可溶性好。SDSPAGE、免疫测定分析显示其相对分子量为34600,具有较高的特异免疫反应性和稳定性。结论NTproBNP能通过基因工程手段以GST融合蛋白的形式大量获取,在非变性条件下得到的GSTNTproBNP有较好的免疫反应活性和稳定性。
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