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目的：利用CRISPR/Cas9技术建立人Vasorin（VASN）基因稳定敲除的HepG2细胞株，并研究VASN蛋白对细胞增殖和迁移等生物学功能的影响。方法：根据人VASN序列设计向导RNA，将其克隆至表达载体pCas-Guide，获得质粒pCas-gRNA；PCR扩增VASN编码基因左、右同源臂及潮霉素B抗性基因，通过重叠PCR将三者拼接为一条片段，并克隆至载体pBackZero-T，获得质粒pBackZero-T-VASN；上述2种重组质粒共转染HepG2细胞，经潮霉素B筛选，通过基因组PCR、RT