论文部分内容阅读
目的
观察外源性脂联素对体外培养的大鼠肝星状细胞HSC-T6氧化应激水平及转化生长因子(TGF)β1和I型胶原(COL-1)表达的影响,并探讨脂联素的抗氧化应激作用是否与腺苷酸激活蛋白激酶(AMPK)信号途径相关。
方法采用实时荧光定量PCR法检测TGFβ1和COL-1 mRNA的表达情况,酶联免疫吸附法检测上清液中TGFβ1和COL-1的表达水平,Western blot方法检测AMPK和p-AMPK的蛋白表达情况。对数据行两独立样本均数t检验、重复测量方差分析。
结果与H2O2刺激组相比,脂联素+H2O2组超氧化物歧化酶活力增加(17.78±1.87与11.30±1.98,P<0.05)、丙二醛含量下降(1.55±0.25与1.91±0.23,P<0.05),TGFβ1、COL-1的基因及蛋白相对表达水平均下降(P<0.05)。1.0μg/ml脂联素处理HSC-T6细胞60、120 min后,AMPK激酶磷酸化水平较空白对照组(0 min)增加(P<0.05),当脂联素作用时间为120 min时达最大值。AMPK抑制剂可逆转脂联素的抗氧化应激作用和抗纤维化作用。
结论抑制氧化应激为脂联素抗肝纤维化机制之一,脂联素可通过激活AMPK信号通路改善HSC-T6氧化应激水平,从而调控TGFβ1和COL-1的表达。