一种构建全长cDNA文库的方法

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建立了一种以LD-PCR为基础的cDNA文库的快速构建方法。以人胎盘组织为材料获得总RNA,利用引物F1、R2在逆转录酶M-MLV的作用下合成cDNA第1链,进而利用引物F3、R4在DNA聚合酶的作用下通过LD-PCR方法合成cDNA第2链;双链cDNA经Sfi Ⅰ酶切,通过T4DNA连接酶连接到经相同酶切的JG45质粒载体后构建成cDNA文库,并对文库的容量、重组率以及多样性进行了分析。结果表明,通过该方法构建的cDNA文库容量约为7.01×10^5个/μgds-cDNA,重组率为96%;对随
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