论文部分内容阅读
摘 要：目的：建立复方奥美拉唑胶囊的含量测定方法 方法：高效液相色谱法测定复方奥美拉唑胶囊中奥美拉唑含量 结果：含奥美拉唑（C41H76N2O15）应为标示量的90.0%～110.0%;采用高效液相色谱法，奥美拉唑在0.21μg～1.05μg范围内，其浓度与峰面积线性关系良好。满足含量测定要求。重复性试验中奥美拉唑RSD分别为0.48%;供试品溶液在室温条件下8小时稳定性试验中，奥美拉唑RSD为0.3%、表明供试品溶液稳定。精密度试验表明，奥美拉唑RSD为0.05%。回收率试验中，奥美拉唑平均回收率为99.56 %，其RSD为0.36%，试验表明该法准确度好。结论：所建立的分析方法可用于复方奥美拉唑胶囊的质量控制。
2006年2月，美国FDA批准了复方奥美拉唑胶囊（奥美拉唑/碳酸氢钠），胶囊的规格为20mg/1.1g和40mg/1.1g，适用于活动性十二指肠溃疡、胃食管反流病、良性胃溃疡的短期治疗以及已愈合糜烂性食管炎的维持治疗。主要通过在制剂中加入大量抗酸剂，服用后可迅速中和胃酸，从而在快速缓解症状的同时又实现了对奥美拉唑的保护，使其不会被胃酸破坏，使奥美拉唑可以在胃内吸收，快速抑制胃酸分泌。目前，我国已有多家公司生产奥美拉唑原料和肠溶口服制剂、注射剂，而复方奥美拉唑胶囊（奥美拉唑/碳酸氢钠，规格为20mg/1.1g）目前国内上市的公司有厦门恩成制药有限公司生产的奥美拉唑碳酸氢钠胶囊（奥美拉唑20mg：碳酸氢钠1100mg）。20mg和40mg复方奥美拉唑胶囊都含有1.1g碳酸氢钠，两粒20mg不等于一粒40mg，因此两粒20mg复方奥美拉唑胶囊不等于一粒40mg的复方奥美拉唑胶囊。该药应至少在饭前1小时服用。两个规格中，20mg的适应症较多。我们主要研究的是复方奥美拉唑胶囊规格为奥美拉唑20mg/碳酸氢钠1.1g。
1 材料与试药
奥美拉唑对照品：购于中国药品生物制品检定所，批号为100367-201706。
试验所用高效液相色谱仪：LC-2010A，Agilent 1200，
色谱柱：Venusil XBP-C8 5μm 4.6μm×250mm Grama HL-C8 5μm 4.6μm×150mm
流动相：0.01mol/L磷酸氢二钠溶液（用磷酸调节pH至7.6）-乙腈（75：25）
检测波长：302nm 所用仪器型号：756PC型紫外-可见分光光度计。
流速：1.0ml/min
2 检测波长的确定
2.1 奥美拉唑对照品溶液 精密称取奥美拉唑对照品10.46mg，置100ml量瓶中，加乙醇10ml与磷酸盐缓冲液（pH11.0）30ml，超声处理使奥美拉唑溶解，用磷酸盐缓冲液（pH11.0）稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取5ml，置50ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，作为奥美拉唑对照品溶液。
2.2 奥美拉唑供试品溶液 取复方奥美拉唑胶囊粉末（约相当于奥美拉唑10mg），置50ml量瓶中，按上述方法制备成供试品溶液。
2.3 奥美拉唑阴性溶液 取碳酸氢钠1.1025g，硬脂酸镁5.24mg，交联羧甲纤维素钠5.47mg，将上述药粉混匀，按上述方法制備成阴性溶液。
2.4 空白溶液（流动相） 取乙醇10ml与磷酸盐缓冲液（pH11.0）30ml置50ml量瓶中，加磷酸盐缓冲液（pH11.0）稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取5ml，置50ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，作为空白溶液。
分别取上述四种溶液，照紫外-可见分光光度法（1）（2015年版四部附录0401 紫外-可见分光光度法测定）在200nm～400nm的波长范围内扫描，结果流动相和奥美拉唑阴性溶液在302nm处无吸收，奥美拉唑在302nm处有最大吸收。因此，302nm可作为奥美拉唑含量测定的检测波长。
3 流动相考察与主峰位确定：取奥美拉唑对照品，精密称定，按照2.1项下方法配制对照品溶液，精密量取20μl注入液相色谱仪，记录色谱图。奥美拉唑峰保留时间为14.454;分离度为35.839，塔板数为13424.238，符合液相色谱的要求;奥美拉唑主峰位峰形和各项数据都符合要求。
4 系统适用性：取流动相考察项下对照品溶液，精密量取20μl注入液相色谱仪，奥美拉唑主峰分离度为36.521;塔板数为13655.423，可以看出系统适用性良好。
5 辅料干扰实验：按2中检测波长的确定项下方法，制备成对照品溶液、供试品溶液、阴性溶液和溶剂，分别精密量取20μl注入液相色谱仪，在此色谱条件下，碳酸氢钠、硬脂酸镁、交联羧甲纤维素钠及溶剂，对奥美拉唑的测定无影响。
6 精密度：取奥美拉唑对照品，按照2.1项下方法配制对照品溶液，精密量取20μl注入液相色谱仪，连续测定6次。试验结果表明，本方法精密度良好。
7 重复性：取复方奥美拉唑胶囊药粉适量（约相当于10mg），精密称5份，按照2.2项下方法配制供试品溶液;分别精密量取供试品溶液20μl，注入液相色谱仪，结果表明重复性良好。
8 回收率：按处方量80%、100%、120%称取奥美拉唑原料，分别加入处方量的碳酸氢钠及辅料，混合均匀后，分别精密称取3份，按照2.2项下方法配制供试品溶液。另取奥美拉唑对照品约11.45mg，精密称定，按照2.1项下方法配制对照品溶液。精密量取对照品溶液和供试品溶液各20μl注入液相色谱仪中。试验结果表明，此法对奥美拉唑进行含量测定回收率良好，且辅料对含量测定没有影响，本方法满足含量测定要求。
9 稳定性：取复方奥美拉唑胶囊粉末，精密称取（相当于奥美拉唑10mg），按照2.2项下方法配制样品溶液，分别在0h，1h，2h，3h，4h，5h，6h，8h，12h，18h，24h精密量取20μl，注入液相色谱仪中。样品在8小时内含量能下降0.801%，所以确定含量检测时间为8小时以内。
10 定量限：精密吸取精密度项下对照品溶液1ml，置100ml的量瓶中，加水稀释至刻度，作为对照品溶液（浓度为0.2004ng/μl）。分别取2μl、3μl、5μl、7μl，注入液相色谱仪，记录色谱图，并计算结果。当信噪比约为10：1时，进样量为5μl，奥美拉唑为1.0ng，所以奥美拉唑在含量测定项下的定量限为1.0ng。将上述溶液，连续进样6次，进样量为5μl，RSD（%）为1.05。符合规定。
11 柱效试验：取奥美拉唑对照品，精密称定，按照2.1项下方法配制对照品溶液。取复方奥美拉唑胶囊药粉分别称取4份，按2.2项下方法操作，作为供试品溶液。分别取上述溶液，用不同型号的二根色谱柱进样。结果可知，二根色谱柱的柱效良好，能很好分离奥美拉唑，含量测定结果无偏差。
12 中间精密度：取奥美拉唑对照品，精密称定，按照2.2项下方法配制供试品溶液，精密量取20μl注入液相色谱仪，连续测定6次。试验结果表明，本方法精密度良好。
13 线性：取精密度项下的对照品溶液，分别精密量取10μl、20μl、30μl、40μl、50μl、注入液相色谱仪，记录色谱图，以进样量（μg）为横坐标，峰面积为纵坐标，绘制标准曲线，计算线性方程。奥美拉唑在0.21μg ～1.05μg范围内进样量与峰面积呈良好线性关系，相关系数r=1.000，满足奥美拉唑含量测定要求。
14 讨论：从奥美拉唑稳定性可以看出，奥美拉唑含量测定溶液不稳定，需要在8小时内检测完毕。经查阅相关文献（2），奥美拉唑溶液避光保存24小时内稳定。需要进一步试验进行验证。我们同时对产品有关物质进行了研究，并确定了杂质限度，以便更好地控制产品质量。
参考文献
[1]国家药典委员会.中华人民共和国药典（四部）2015版.北京：化学工业出版社。2015：
[2]胡晨.邓紫薇.王旭.房志仲.朱立勤.复方奥美拉唑胶囊质量控制方法的研究.天津医科大学学报.2014.20（3）.243
2006年2月，美国FDA批准了复方奥美拉唑胶囊（奥美拉唑/碳酸氢钠），胶囊的规格为20mg/1.1g和40mg/1.1g，适用于活动性十二指肠溃疡、胃食管反流病、良性胃溃疡的短期治疗以及已愈合糜烂性食管炎的维持治疗。主要通过在制剂中加入大量抗酸剂，服用后可迅速中和胃酸，从而在快速缓解症状的同时又实现了对奥美拉唑的保护，使其不会被胃酸破坏，使奥美拉唑可以在胃内吸收，快速抑制胃酸分泌。目前，我国已有多家公司生产奥美拉唑原料和肠溶口服制剂、注射剂，而复方奥美拉唑胶囊（奥美拉唑/碳酸氢钠，规格为20mg/1.1g）目前国内上市的公司有厦门恩成制药有限公司生产的奥美拉唑碳酸氢钠胶囊（奥美拉唑20mg：碳酸氢钠1100mg）。20mg和40mg复方奥美拉唑胶囊都含有1.1g碳酸氢钠，两粒20mg不等于一粒40mg，因此两粒20mg复方奥美拉唑胶囊不等于一粒40mg的复方奥美拉唑胶囊。该药应至少在饭前1小时服用。两个规格中，20mg的适应症较多。我们主要研究的是复方奥美拉唑胶囊规格为奥美拉唑20mg/碳酸氢钠1.1g。
1 材料与试药
奥美拉唑对照品：购于中国药品生物制品检定所，批号为100367-201706。
试验所用高效液相色谱仪：LC-2010A，Agilent 1200，
色谱柱：Venusil XBP-C8 5μm 4.6μm×250mm Grama HL-C8 5μm 4.6μm×150mm
流动相：0.01mol/L磷酸氢二钠溶液（用磷酸调节pH至7.6）-乙腈（75：25）
检测波长：302nm 所用仪器型号：756PC型紫外-可见分光光度计。
流速：1.0ml/min
2 检测波长的确定
2.1 奥美拉唑对照品溶液 精密称取奥美拉唑对照品10.46mg，置100ml量瓶中，加乙醇10ml与磷酸盐缓冲液（pH11.0）30ml，超声处理使奥美拉唑溶解，用磷酸盐缓冲液（pH11.0）稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取5ml，置50ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，作为奥美拉唑对照品溶液。
2.2 奥美拉唑供试品溶液 取复方奥美拉唑胶囊粉末（约相当于奥美拉唑10mg），置50ml量瓶中，按上述方法制备成供试品溶液。
2.3 奥美拉唑阴性溶液 取碳酸氢钠1.1025g，硬脂酸镁5.24mg，交联羧甲纤维素钠5.47mg，将上述药粉混匀，按上述方法制備成阴性溶液。
2.4 空白溶液（流动相） 取乙醇10ml与磷酸盐缓冲液（pH11.0）30ml置50ml量瓶中，加磷酸盐缓冲液（pH11.0）稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取5ml，置50ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，作为空白溶液。
分别取上述四种溶液，照紫外-可见分光光度法（1）（2015年版四部附录0401 紫外-可见分光光度法测定）在200nm～400nm的波长范围内扫描，结果流动相和奥美拉唑阴性溶液在302nm处无吸收，奥美拉唑在302nm处有最大吸收。因此，302nm可作为奥美拉唑含量测定的检测波长。
3 流动相考察与主峰位确定：取奥美拉唑对照品，精密称定，按照2.1项下方法配制对照品溶液，精密量取20μl注入液相色谱仪，记录色谱图。奥美拉唑峰保留时间为14.454;分离度为35.839，塔板数为13424.238，符合液相色谱的要求;奥美拉唑主峰位峰形和各项数据都符合要求。
4 系统适用性：取流动相考察项下对照品溶液，精密量取20μl注入液相色谱仪，奥美拉唑主峰分离度为36.521;塔板数为13655.423，可以看出系统适用性良好。
5 辅料干扰实验：按2中检测波长的确定项下方法，制备成对照品溶液、供试品溶液、阴性溶液和溶剂，分别精密量取20μl注入液相色谱仪，在此色谱条件下，碳酸氢钠、硬脂酸镁、交联羧甲纤维素钠及溶剂，对奥美拉唑的测定无影响。
6 精密度：取奥美拉唑对照品，按照2.1项下方法配制对照品溶液，精密量取20μl注入液相色谱仪，连续测定6次。试验结果表明，本方法精密度良好。
7 重复性：取复方奥美拉唑胶囊药粉适量（约相当于10mg），精密称5份，按照2.2项下方法配制供试品溶液;分别精密量取供试品溶液20μl，注入液相色谱仪，结果表明重复性良好。
8 回收率：按处方量80%、100%、120%称取奥美拉唑原料，分别加入处方量的碳酸氢钠及辅料，混合均匀后，分别精密称取3份，按照2.2项下方法配制供试品溶液。另取奥美拉唑对照品约11.45mg，精密称定，按照2.1项下方法配制对照品溶液。精密量取对照品溶液和供试品溶液各20μl注入液相色谱仪中。试验结果表明，此法对奥美拉唑进行含量测定回收率良好，且辅料对含量测定没有影响，本方法满足含量测定要求。
9 稳定性：取复方奥美拉唑胶囊粉末，精密称取（相当于奥美拉唑10mg），按照2.2项下方法配制样品溶液，分别在0h，1h，2h，3h，4h，5h，6h，8h，12h，18h，24h精密量取20μl，注入液相色谱仪中。样品在8小时内含量能下降0.801%，所以确定含量检测时间为8小时以内。
10 定量限：精密吸取精密度项下对照品溶液1ml，置100ml的量瓶中，加水稀释至刻度，作为对照品溶液（浓度为0.2004ng/μl）。分别取2μl、3μl、5μl、7μl，注入液相色谱仪，记录色谱图，并计算结果。当信噪比约为10：1时，进样量为5μl，奥美拉唑为1.0ng，所以奥美拉唑在含量测定项下的定量限为1.0ng。将上述溶液，连续进样6次，进样量为5μl，RSD（%）为1.05。符合规定。
11 柱效试验：取奥美拉唑对照品，精密称定，按照2.1项下方法配制对照品溶液。取复方奥美拉唑胶囊药粉分别称取4份，按2.2项下方法操作，作为供试品溶液。分别取上述溶液，用不同型号的二根色谱柱进样。结果可知，二根色谱柱的柱效良好，能很好分离奥美拉唑，含量测定结果无偏差。
12 中间精密度：取奥美拉唑对照品，精密称定，按照2.2项下方法配制供试品溶液，精密量取20μl注入液相色谱仪，连续测定6次。试验结果表明，本方法精密度良好。
13 线性：取精密度项下的对照品溶液，分别精密量取10μl、20μl、30μl、40μl、50μl、注入液相色谱仪，记录色谱图，以进样量（μg）为横坐标，峰面积为纵坐标，绘制标准曲线，计算线性方程。奥美拉唑在0.21μg ～1.05μg范围内进样量与峰面积呈良好线性关系，相关系数r=1.000，满足奥美拉唑含量测定要求。
14 讨论：从奥美拉唑稳定性可以看出，奥美拉唑含量测定溶液不稳定，需要在8小时内检测完毕。经查阅相关文献（2），奥美拉唑溶液避光保存24小时内稳定。需要进一步试验进行验证。我们同时对产品有关物质进行了研究，并确定了杂质限度，以便更好地控制产品质量。
参考文献
[1]国家药典委员会.中华人民共和国药典（四部）2015版.北京：化学工业出版社。2015：
[2]胡晨.邓紫薇.王旭.房志仲.朱立勤.复方奥美拉唑胶囊质量控制方法的研究.天津医科大学学报.2014.20（3）.243