【摘 要】
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选取胎儿期(4～5月龄)、犊牛期(1岁)、性成熟期(3岁)的健康雄性牦牛各2头,分离其睾丸组织,利用Illumi-na平台对各样本miRNA进行测序,其中同一年龄段的2个样本被视为生物学重复;分析各阶段样本的miRNA数量、碱基偏好性和表达水平,对新miRNA进行预测,对显著差异表达的miRNA的靶基因进行gene ontology(GO)富集分析.结果 显示,胎儿期miRNA占small RNA(sRNA)的比例显著多于犊牛期和性成熟期(P＜0.05).共发现新miRNA成熟体77个,新miRNA前体共
【机 构】
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西南民族大学畜牧兽医学院,四川成都610041;西南民族大学畜牧兽医学院,四川成都610041;青藏高原动物遗传资源保护与利用教育部重点实验室,四川成都610041;青藏高原动物遗传资源保护与利用四川
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选取胎儿期(4～5月龄)、犊牛期(1岁)、性成熟期(3岁)的健康雄性牦牛各2头,分离其睾丸组织,利用Illumi-na平台对各样本miRNA进行测序,其中同一年龄段的2个样本被视为生物学重复;分析各阶段样本的miRNA数量、碱基偏好性和表达水平,对新miRNA进行预测,对显著差异表达的miRNA的靶基因进行gene ontology(GO)富集分析.结果 显示,胎儿期miRNA占small RNA(sRNA)的比例显著多于犊牛期和性成熟期(P＜0.05).共发现新miRNA成熟体77个,新miRNA前体共80个,已知miRNA的首位具有尿嘧啶(U)碱基偏好性,新miRNA的首位具有胞嘧啶(C)碱基偏好性.差异表达分析发现胎儿期与犊牛期间显著差异表达miRNA共224个,犊牛期与性成熟期间显著差异表达miRNA共36个,胎儿期与性成熟期间显著差异表达miRNA共239个.GO分析发现显著差异表达的miRNA其靶基因的数目在生物学过程排首位的是代谢过程,并从显著差异表达的miRNA的靶基因中筛选出了与精子发生及与精子功能相关的靶基因20个.结果 表明,牦牛睾丸发育过程中,胎儿期的miRNA的数量及部分miRNA的表达水平与胚后阶段相比有明显的差异;新miRNA与已知miRNA相比可能存在未知加工机制;不同发育阶段牦牛睾丸之间部分显著差异表达的miRNA可能通过调控其靶基因的表达进而参与精子发生.
其他文献
选取345只6月龄、体质量(30±5)kg的滩羊(163只公羊和182只母羊),饲喂时采用颈夹方式固定羊,且对其不限定运动的情况下进行饲养,饲喂相同颗粒饲料,过渡期15d,预试期10 d,正试期50 d.采用多元回归模型计算出每只羊的剩余采食量(residual feed intake,RFI)后,将羊分别归入高RFI组(RFI＞(x)+0.5s)、中RFI组((x)-0.5s≤RFI≤(x)+0.5s)和低RFI组(RFI＜(x)-0.5s).使用SPSS Statistics 17.0软件中的方差分析
本试验根据猪圆环病毒2型(PCV2) Cap蛋白表位,结合文献报道及软件预测,设计合成肽抗原;再用PCV2阳性血清进行筛选,优选出4条肽的混合肽段作为包被抗原;继而通过最适条件摸索,建立PCV2合成肽间接ELISA抗体检测方法,并从该方法的敏感性、特异性、重复性及其他试剂盒进行比对试验等关键性指标进行评估.结果 显示,间接ELISA的敏感性为95.0％,特异性为97.5％,批内变异系数在3.4％ ～7.2％,批间重复性变异系数在4.8％～8.6％.比对试验结果显示,本间接ELISA与PCV2 Cap蛋白包
为探究维生素C体外抑制鲤春病毒血症病毒(SVCV)侵染鲤鱼上皮瘤细胞(EPC)的能力,本试验构建了体外EPC模型,并运用MTT法、DAPI染色和活性氧测定等方法测定维生素C和SVCV对细胞活性的影响及维生素C对SVCV的抑制作用.结果 显示,维生素C对SVCV体外侵染EPC具有显著的抑制作用(P＜0.05),且与维生素C浓度呈正相关.本试验可为SVCV的防治提供新的途径.
本试验采用构建DNA混池和测序的方法,对西藏、青海341头牦牛TLR-4基因3\'-UTR区单核苷酸多态性(SNP)位点进行筛选,然后用DNAMAN 8.0软件进行序列对比分析,并通过TargetScan 7数据库预测牦牛TLR-4基因3\'-UTR区的微小RNAs (miRNAs)的可能靶定.结果 显示,牦牛TLR-4基因3\'-UTR区可能存在2个SNP位点,分别为A38UG和A382G,通过TargetScan7数据库在线预测到牦牛TLR-4基因3\'-UTR区共18个miRNAs可
为了建立一种快速鉴别检测猪源牛病毒性腹泻病毒(猪源BVDV)和猪瘟病毒(CSFV)的方法,根据GenBank中猪源BVDV和CSFV 5\'UTR基因序列分别设计合成特异性检测引物,经一步法双重RT-PCR反应条件的优化,建立了鉴别检测猪源BVDV和CSFV的一步法双重PCR方法.该方法对猪源BVDV、CSFV、猪源BVDV/CSFV混合物可分别扩增出185、342、185 bp和342 bp的特异性条带,检测PRRSV、PRV、PPV、PCV-2、PEDV、JEV、TGEV均为阴性,对猪源BVDV、
为了评价重组质粒pSMART2b-Etgam22抗柔嫩艾美耳球虫的保护效果,本试验用PCR扩增获得Etgam22基因后连接至pSMART2b载体以构建重组质粒pSMART2b-Etgam22,用Western Blot分析重组质粒pSMART2b-Etgam22在293T细胞中的表达情况,用重组质粒pSMART2b-Etgam22免疫雏鸡,并检测抗体水平和细胞因子分泌情况,随后用柔嫩艾美耳球虫卵囊感染免疫的雏鸡,观察死亡情况,检测体重变化、卵囊数量、盲肠病变,通过抗球虫指数评价pSMART2b-Etgam
猫杯状病毒(FCV)是引起猫科动物呼吸道疾病的重要病原之一,常用患病猫的口鼻眼拭子进行病原学诊断或病毒分离,病原微生物的混合感染给病毒的分离纯化带来困难.为了快速获得纯化的FCV,本试验将临床检测FCV和猫疱疹病毒Ⅰ型(FHV-1)混合病料处理后进行蚀斑纯化及条件优化.结果 显示:将细胞数约为7×105个/mL的F81细胞以每孔2 mL铺入6孔板中,待病毒吸附90 min后覆盖浓度为2％的第1层低熔点琼脂糖溶液,于37 ℃、5％ CO2培养箱倒置培养48 h,然后加入含0.01％中性红的第2层低熔点琼脂糖
为了提高检测猪圆环病毒3型(PCV3)的稳定性、特异性和灵敏度,本试验根据猪圆环病毒3型分离株PCV3-Hebei-LY_2015(GenBank登录号:MF318451.1)Cap蛋白保守区域设计了特异性引物和探针,建立了PCV3 TaqMan荧光定量PCR检测方法.该方法最低可检测到11.8 copies/μL,经过组内和组间重复试验两者变异系数均小于2％,表明该方法具有良好的稳定性和可重复性;与猪瘟病毒(CSFV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪圆环病毒2型病毒(PCV2)、猪伪狂犬病毒(
本试验旨在观察不同光照周期对新西兰母兔同期发情和褪黑激素分泌的影响,从而分析褪黑激素在光照周期下调控母兔发情的变化情况.选用5月龄未经产的新西兰母兔48只,随机分成3组,每组16只,前10天各试验组采用12-h L/12-h D光照制度,后6天分别采用长光照组(16-h L/8-h D)、短光照组(8-h L/16-h D)和对照组(12-h L/12-h D)光照制度,光照强度(80±5) Lx.试验后收集各组血清并统计发情率,应用ELISA方法检测血浆中褪黑素的含量.结果 显示,3个周期组中长光照组的
为了研究黄藤素与6种抗生素联合用药对禽源多重耐药金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,SA)的体外抗菌效果,本试验采用纸片扩散法检测临床分离株的耐药性,采用96孔板微量肉汤稀释法检测黄藤素对3株SA耐药菌株的最低抑菌浓度(MIC),采用改良的纸片扩散法检测黄藤素与6种抗生素联用对3株禽源耐药菌的抗菌效果.结果 显示,3株临床分离株均为多重耐药菌;黄藤素与抗菌药物联合后,3株临床耐药菌株对5种抗生素的药物敏感性有不同程度的增高,抑菌圈直径增幅从1.04 mm到27.13 mm不等,其中