【摘 要】
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经RT-PCR扩增了禽流感病毒A/Goose/GuangDong/1/96 (H5N1) 1.7kb HA基因的cDNA将其克隆到pMD18-T中并测序.在去除编码HA信号肽的核苷酸序列后,亚克隆到杆状病毒转移载体pBlue
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经RT-PCR扩增了禽流感病毒A/Goose/GuangDong/1/96 (H5N1) 1.7kb HA基因的cDNA将其克隆到pMD18-T中并测序.在去除编码HA信号肽的核苷酸序列后,亚克隆到杆状病毒转移载体pBlueBacHis4.5,筛选到重组质粒命名为rpBacHisH5HA.测序正确后,在脂质体介导下,与线性化的杆状病毒DNA(Bac-N-BlueTM DNA)共转染Sf9昆虫细胞,挑取蓝色蚀斑,经3轮蚀斑纯化,获得数株重组杆状病毒rBacHisH5HA.提取重组病毒DNA经PCR证明目的基因片段已插入杆状病毒基因组.
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