【摘 要】
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目的 研究经香烟烟雾提取物(CSE)刺激后大鼠股四头肌细胞8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)含量的变化以及细胞内活性氧(ROS)水平和8-羟基鸟嘌呤DNA糖苷酶1(OGG1)表达对8-OHdG含量变化的影响.方法 用不同浓度CSE分别刺激大鼠股四头肌细胞24 h、48 h和72 h后,采用高效液相色谱-电化学法(HPLC-ECD)检测大鼠股四头肌细胞8-OHdG的含量,流式细胞术检测大鼠股四头肌细胞
【机 构】
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510080广州,广东省人民医院广东省医学科学院呼吸内科广东省老年医学研究所,510080广州,广东省人民医院广东省医学科学院呼吸内科广东省老年医学研究所,510080广州,广东省人民医院广东省医学科
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目的 研究经香烟烟雾提取物(CSE)刺激后大鼠股四头肌细胞8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)含量的变化以及细胞内活性氧(ROS)水平和8-羟基鸟嘌呤DNA糖苷酶1(OGG1)表达对8-OHdG含量变化的影响.方法 用不同浓度CSE分别刺激大鼠股四头肌细胞24 h、48 h和72 h后,采用高效液相色谱-电化学法(HPLC-ECD)检测大鼠股四头肌细胞8-OHdG的含量,流式细胞术检测大鼠股四头肌细胞ROS水平,实时定量PCR(Realtime PCR)检测OGG1 mRNA水平,用Western blot检测OGG1蛋白水平.结果 经相同CSE浓度分别刺激大鼠股四头肌细胞24 h、48 h和72 h后,大鼠股四头肌细胞中8-OHdG含量、ROS水平及OGG1 mRNA和蛋白水平差异均无统计学意义.但经不同浓度CSE刺激相同时间后,10.00％ CSE和20.00％CSE刺激组大鼠股四头肌细胞8-OHdG含量明显高于对照组和5.00％ CSE刺激组(P＜0.05);大鼠股四头肌细胞内ROS水平、OGG1 mRNA和蛋白水平较对照组均明显升高(P＜0.05);大鼠股四头肌细胞8-OHdG含量与其ROS水平呈明显正相关(r=0.746,P＝0.000);经CSE刺激后,大鼠股四头肌细胞OGG1 mRNA和蛋白水平均高于对照组(P＜0.05),但大鼠股四头肌细胞8-OHdG含量与其OGG1 mRNA和蛋白水平无明显相关(r=0.392,P＝0.536;r=0.297,P=0.426).结论 CSE刺激可引起大鼠股四头肌细胞8-OHdG升高,8-OHdG含量与ROS水平有关,但与其修复酶OGG1表达水平无明显相关。
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