论文部分内容阅读
目的:观察纤维蛋白-1c(Fibulin-1c)对老年膝骨关节炎(OA)软骨细胞增殖代谢的影响。方法:2018年8月至2019年8月，收集山西白求恩医院因外伤截肢年轻人和人工膝关节置换术时老年膝OA患者10例的血清、膝关节软骨标本，检测标本中Fibulin-1c的含量变化。实验分4组，实验组1为培养液含rFibulin-1c(10 μg/L)；实验组2为培养液含rFibulin-1c(100 μg/L)；实验组3为培养液含rFibulin-1c(200 μg/L)；对照组为单纯培养液。常规培养人软骨细胞，实验组培养液中加入不同浓度(10、100、200 μg/L)重组人Fibulin-1c蛋白，培养48 h后，5-乙炔基-2’脱氧尿嘧啶核苷(EdU)检测软骨细胞增殖，蛋白质印迹法(Western blot)和实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测软骨细胞Col2、基质金属蛋白酶(MMP)-13、Smad3和pSmad3的表达。组间比较采用n t检验和单因素方差分析。n 结果:年轻人血清Fibulin-1c蛋白相对表达量为(1.009±0.109)，老年人为(0.695±0.071)，两者比较差异有统计学意义(n t＝2.406，n P<0.05)；年轻人软骨中蛋白相对表达量(1.021±0.097)高于老年人(0.733±0.079，n t＝2.297，n P<0.05)，差异有统计学意义。实验组EdU阳性细胞百分比[(25.330±1.453)%、(34.170±2.822)%]高于对照组[(13.170±1.447)%，n F＝24.300，n P<0.01]，差异有统计学意义；与对照组(0.786±0.042)比较，实验组软骨细胞Col2含量增高(1.470±0.105、1.880±0.120，n F＝30.110，n P<0.01)，差异有统计学意义；Col2的基因表达水平与蛋白表达水平一致。n 结论:Fibulin-1c可以促进老年膝关节软骨细胞增殖代谢能力。