【摘 要】
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目的 检测胸苷激酶1(TK1)在宫颈癌中的表达,并分析其对顺铂敏感性和恶性进展的影响.方法 将TK1空载质粒和TK1小干扰RNA转染至培养的宫颈癌HeLa、SiHa分别记为TK1-NC组和TK1-siRNA组.通过实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测各组细胞中TK1 mRNA表达水平;以细胞计数法-8(CCK-8)检测细胞的增殖情况;以原位末端标记(TUNEL)法检测细胞的凋亡情况.裸鼠成瘤实验将5 mg·kg-1顺铂(cisplatin,DDP)分别与TK1-NC和TK1-siRNA皮下
【机 构】
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师宗县人民医院,健康管理中心,云南 曲靖655700;云南大学 附属医院 干部体检中心,云南 昆明 650021;师宗县人民医院,妇科,云南 曲靖655700;云南省第一人民医院,临床心理科,云南 昆
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目的 检测胸苷激酶1(TK1)在宫颈癌中的表达,并分析其对顺铂敏感性和恶性进展的影响.方法 将TK1空载质粒和TK1小干扰RNA转染至培养的宫颈癌HeLa、SiHa分别记为TK1-NC组和TK1-siRNA组.通过实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测各组细胞中TK1 mRNA表达水平;以细胞计数法-8(CCK-8)检测细胞的增殖情况;以原位末端标记(TUNEL)法检测细胞的凋亡情况.裸鼠成瘤实验将5 mg·kg-1顺铂(cisplatin,DDP)分别与TK1-NC和TK1-siRNA皮下注射至裸鼠体内,分别记为TK1-NC+DDP组和TK1-siRNA+DDP组,检测TK1对HeLa细胞顺铂敏感性的影响.结果 TK1在HaCaT、HeLa及SiHa细胞中的表达分别为1.05±0.13,3.64±0.34,5.25±0.50.TK1-NC组HeLa、SiHa细胞中TK1的表达分别为1.67±0.18,1.81±0.17,凋亡率分别为(5.26±1.32)％,(5.22±1.34)％;TK1-siRNA组HeLa、SiHa细胞中TK1的表达分别为0.45±0.05,0.39±0.04,凋亡率分别为(36.65±3.64)％,(34.25±3.42)％.TK1-siRNA组第1、7和14天肿瘤生长体积分别为(105.30±10.20),(421.00±42.31)和(974.27±96.73)mm3,TK1-NC组第1、7和14天肿瘤生长体积分别为(109.21±10.12),(527.52±50.15)和(723.10±71.54)mm3,TK1-NC+DDP组第15、21和28天肿瘤生长体积分别为(954.34±95.87),(668.34±66.44)和(437.33±48.45)mm3,TK1-siRNA+DDP组第15、21和28天肿瘤生长体积分别为(947.11±94.55),(514.33±51.57)和(205.41±21.64)mm3.HeLa、SiHa细胞与HaCaT细胞比较,TK1-siRNA组与TK1-NC组比较,TK1-siRNA+DDP组与TK1-NC+DDP组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05).沉默宫颈癌细胞中TK1表达后,细胞增殖和存活率显著降低,肿瘤细胞对顺铂敏感性增强.体内成瘤实验显示结果沉默TK1后裸鼠肿瘤体积显著缩小,生长速度减慢,对顺铂敏感性增加.结论 沉默TK1可以抑制宫颈癌细胞的增殖,促进细胞凋亡,并且能够增强宫颈癌细胞对顺铂敏感性.
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