【摘 要】
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叉头框转录因子O亚族1(forkhead box transcription factorO1,FoxO1)在细胞增殖、分化过程中发挥重要的作用。为了阐明其磷酸化水平对猪前体脂肪细胞分化的影响及其分子机理,
【基金项目】
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国家转基因生物新品种培育重大专项基金(No.2009ZX08009-157B);西北农林科技大学动物科学实验教学示范中心资助项目共同资助
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叉头框转录因子O亚族1(forkhead box transcription factorO1,FoxO1)在细胞增殖、分化过程中发挥重要的作用。为了阐明其磷酸化水平对猪前体脂肪细胞分化的影响及其分子机理,本研究分离培养猪前体脂肪细胞,用FoxO1的激活剂渥曼青霉素(wortmannin,WM)处理后,采用油红O染色、油红O化学比色法检测猪前体脂肪细胞分化情况,运用qRT-PCR和Western blot方法分析FoxO1及脂肪细胞分化标志基因mRNA和蛋白的表达情况。结果显示,随着脂肪细胞分化,FoxO1 mRNA和蛋白水平以及磷酸化的FoxO1(p-FoxO1)蛋白水平明显升高;WM处理猪前体脂肪细胞后第5天FoxO1蛋白的表达较对照组显著升高(P<0.05),而FoxO1蛋白磷酸化水平显著下降,FoxO1 mRNA表达水平无显著变化(P>0.05);油红O染色结果显示,脂肪细胞分化受到显著抑制(P<0.05);脂肪细胞分化标志基因PPARγ和C/EBPα mRNA表达显著低于对照组(P<0.05)。研究结果提示,WM能降低FoxO1的磷酸化水平,并通过降低PPARγ和C/EBPα mRNA表达来抑制猪前体脂肪细胞分化。FoxO1去磷酸化可以抑制猪前体脂肪细胞分化。
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