【摘 要】
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目的:建立用荧光定量PCR方法检测猪IGF-Ⅰ基因表达量的标准曲线.方法:根据自己克隆的猪IGF-Ⅰ(GenBankNo.DQ784687)基因mRNA序列,设计合成引物和探针,采用Taqman探针荧光定量
【机 构】
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吉林大学实验动物中心,吉林省农业科学院,吉林大学畜牧兽医学院,河南科技学院动物科学学院
【基金项目】
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国家振兴东北老工业基地科技攻关项目;
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目的:建立用荧光定量PCR方法检测猪IGF-Ⅰ基因表达量的标准曲线.方法:根据自己克隆的猪IGF-Ⅰ(GenBankNo.DQ784687)基因mRNA序列,设计合成引物和探针,采用Taqman探针荧光定量RT-PCR的检测方法,构建检测猪IGF-Ⅰ基因表达量的标准曲线.结果:由pMD-18TIGF-Ⅰ所构建的标准曲线线性关系良好(反应体系中含1×102～1×106拷贝猪IGF-Ⅰ基因分子时,扩增反应Ct值与拷贝数的对数呈线性关系)、灵敏度高(可检测出低于10个拷贝/μL的样品)、特异性强、准确可靠.结论:成功构建了用荧光定量RT-PCR方法检测猪IGF-Ⅰ基因表达量的标准曲线.
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