【摘 要】
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慢病毒载体是基因治疗的重要基因转导工具,在嵌合抗原受体(Chimeric Antigen Receptor,CAR)T细胞治疗血液肿瘤中发挥着极其重要的作用.制备高质量CAR-T细胞的先决条件是获得
【机 构】
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中国科学院深圳先进技术研究院 深圳 518055;中国科学院大学 北京 100049;广东省免疫细胞治疗工程技术研究中心 深圳 518055
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慢病毒载体是基因治疗的重要基因转导工具,在嵌合抗原受体(Chimeric Antigen Receptor,CAR)T细胞治疗血液肿瘤中发挥着极其重要的作用.制备高质量CAR-T细胞的先决条件是获得高滴度的慢病毒,而高滴度的实现离不开浓缩步骤.其中,超速离心(超离)和超滤是两种潜在的可选浓缩方法.为探究超离和超滤两种浓缩方法在制备科研级CAR-T时的效率和对病毒的活力影响,该研究选择GFP和CD19 CAR (CARl9)-mCherry两种质粒包装病毒,并对两种方法产生的病毒滴度和回收率进行比较.结果 显示,超滤产生的慢病毒滴度最高达到1011 TU/mL,显著高于超离法产生的慢病毒滴度(P＜0.05),同时超滤的回收效率也更高.该结果可为科研级CAR慢病毒的浓缩方法提供直接的理论参考依据,有助于CAR-T基础研究的顺利开展.
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