利用细胞-指数式富集的配体系统进化技术筛选肿瘤细胞DNA适配子

来源 :上海交通大学学报(医学版) | 被引量 : 0次 | 上传用户:hl03031121
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目的建立一种通用的细胞-指数式富集的配体系统进化(Cell—SELEX)技术平台,用于筛选特异性结合于肿瘤细胞的DNA适配子。方法采用PCR法建立随机双链DNA(dsDNA)寡核苷酸文库,用卵白素包被的琼脂糖珠从dsDNA库分离单链DNA(ssDNA)文库;以体外培养的肿瘤细胞作为正筛选的靶标,以相同组织来源的正常对照细胞作为负筛选的靶标,消减法进行Cell—SELEX筛选和PCR扩增以获取DNA适配子;流式细胞仪监测适配子的富集效率(亲和力);采用常规分子生物学技术进行适西亡子的克隆、测序和序列分析。结
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