观察CD147拮抗肽-9(AP-9)及多西环素(DOX)分别及联合用药对胆囊癌细胞(GBC-SD)的增殖、凋亡、CD147表达和基质金属蛋白酶(MMP)-9活性的影响。
方法将AP-9(50、100、200、400 μg/ml)、DOX(5、10、20、40 μg/ml)和联合用药(AP-9 200 μg/ml + DOX 20 μg/ml)作用于胆囊癌细胞12、24、48 h,细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测细胞增殖,Western blot法检测CD147表达,明胶酶谱法检测MMP-9活性,膜联蛋白V(Annexin V)/碘化丙锭(PI)染色法流式细胞仪检测早期凋亡率,结果采用t检验。
结果不同浓度AP-9处理组的早期凋亡率(2.13±0.10)%、(2.92±0.19)%较对照组(1.58±0.08)%升高(P=0.002、P=0.001);MMP-9活性(320.08±33.90、249.59±33.63、259.63±34.08、172.31±35.20)较对照组(446.08±42.42)降低(P=0.013、0.002、0.003、0.001);增殖抑制率较对照组升高(P均=0.001)且呈时间和剂量依赖趋势。不同浓度多西环素处理组的早期凋亡率(3.25±0.12)%、(3.63±0.24)%较对照组(1.58±0.08)%明显升高(P均=0.001);MMP-9活性(203.52±18.25、175.22±23.30、147.86±22.83、109.99±29.22)较对照组(446.08±42.42)降低(P均=0.001);增殖抑制率较对照组升高(P均=0.001),CD147表达(0.97±0.12、0.80±0.10、0.69±0.11、0.51±0.12)较对照组(2.04±0.15)明显降低(P均=0.001)。联合用药后较单独用药,细胞增殖抑制率(38.78±0.39)%、(43.76±0.71)%、(52.00±0.91)%升高(P=0.001、P=0.003),MMP-9活性(110.19±24.74)降低(P=0.001、P=0.024),早期凋亡率(3.73±0.29)%升高(P=0.001、P=0.048)。
结论DOX可减少胆囊癌细胞CD147表达,AP-9和DOX单独或联合用药均可以抑制胆囊癌细胞增殖、抑制MMP-9活性,促进细胞凋亡,且联合用药后抑制作用增强。