全人源抗Met双价抗体的制备与特性分析

来源 :中华临床医师杂志(电子版) | 被引量 : 0次 | 上传用户：qczjhyt

【摘要】

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目的以抗HGF受体Met特异性的全人抗体Fab基因为模板，合成并表达双价抗体Diabody。方法以天然抗体库中筛选出的Fab基因为模板，分别扩增抗体的重链可变区与轻链可变区基因，经重叠

【作者】

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徐凛峰朱进唐奇张大为曹伯良管晓虹

【机构】

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南京医科大学第二附属医院普外科,南京军区军事医学研究所医药生物技术室,南京医科大学卫生部抗体技术重点实验室

【出处】

：

中华临床医师杂志(电子版)

【发表日期】

：

2008年12期

【关键词】

：

抗肿瘤药原癌基因蛋白质C-MET 抗体基因表达 Antineoplastic agents Proto-oncogene proteins c-met

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目的以抗HGF受体Met特异性的全人抗体Fab基因为模板，合成并表达双价抗体Diabody。方法以天然抗体库中筛选出的Fab基因为模板，分别扩增抗体的重链可变区与轻链可变区基因，经重叠拼接合成Diabody基因，克隆于原核表达载体pBAD／gⅢA中表达。在不同的培养条件下，阳性克隆经IPTG诱导表达，ELISA、SDS—PAGE、Western-blot和细胞免疫荧光分析。结果培养基成分和诱导剂的浓度对目的蛋白的表达未见有明显的影响，低温诱导能够促进可溶性蛋白的产生；但电泳与印迹分析表明，在29kD出现预

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