【摘 要】
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目的构建带绿色荧光蛋白(GFP)的pcDNA6/myc-hisB的真核表达载体。方法采用亚克隆的技术扩增得到GFP的开放阅读框序列,HindⅢ和KpnⅠ双酶切后插入pcDNA6/myc-hisB,重组体经质粒P
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目的构建带绿色荧光蛋白(GFP)的pcDNA6/myc-hisB的真核表达载体。方法采用亚克隆的技术扩增得到GFP的开放阅读框序列,HindⅢ和KpnⅠ双酶切后插入pcDNA6/myc-hisB,重组体经质粒PCR和酶切鉴定,并转染HEK293T细胞后观察绿色荧光的表达,同时经Western blot检测GFP和标签蛋白myc的表达。结果 PCR扩增得到特异的GFP开放阅读框序列,质粒PCR和酶切鉴定显示pcDNA6/myc-hisB-GFP构建成功,细胞转染结果表明重组体可以表达GFP和myc蛋白。结论
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