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为构建和表达抗RT单链抗体（ScFv）蛋白,用RT-PCR方法从能分泌特异性抗RT单克隆抗体（McAb）的杂交瘤细胞中分离纯化抗体VH和VL基因。用重叠延伸PCR方法将VH和VL拼接在一起,构建抗RT-ScFv基因。将ScFv基因连接到pMAL-p2X表达载体,转化TB1表达菌。阳性克隆用IPTG诱导18h,Western blotting鉴定重组蛋白。结果表明,试验成功扩增出了ScFv基因,长度约为750bp。通过DNA序列测定和分析,构建出VL-（Gly4Ser）3-VH。其VH全长363bp,可编码