猪白细胞介素-2在BHK-21细胞中表达及其活性分析

来源 :中国预防兽医学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：gyf2033

【摘要】

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为鉴定BHK-21细胞中稳定表达猪白细胞介素-2（PoIL-2）的活性,本研究利用RT-PCR技术从猪的淋巴细胞中克隆PoIL-2基因,将其连接于pcDNA3.1载体中,并转染BHK-21细胞。经过G418筛选

【作者】

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王大伟乔军张辉胡圣伟丁波陈创夫

【机构】

：

f石河子大学动物科技学院

【出处】

：

中国预防兽医学报

【发表日期】

：

2011年5期

【关键词】

：

猪白细胞介素2 真核表达实时定量PCR 淋巴细胞增殖试验 porcine interleukin-2 eukaryotic expression real

【基金项目】

：

转基因生物新品种培育国家重大专项（2009ZX08005-003B）

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为鉴定BHK-21细胞中稳定表达猪白细胞介素-2（PoIL-2）的活性,本研究利用RT-PCR技术从猪的淋巴细胞中克隆PoIL-2基因,将其连接于pcDNA3.1载体中,并转染BHK-21细胞。经过G418筛选及RT-PCR鉴定,获得稳定表达PoIL-2基因的BHK-21细胞系。采用实时定量PCR及ELISA测定PoIL-2在BHK-21细胞内的表达,同时以淋巴细胞增殖试验（MTT）检测PoIL-2蛋白活性。试验结果表明稳定整合PoIL-2基因的BHK-21细胞系其PoIL-2mRNA的转录效率是阴性对照

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