目的了解广州地区腹泻患者中分离的艰难梭菌(CD)耐药情况及耐药发生的可能机制。方法收集广州3家医院的腹泻患者粪便标本467份。PCR方法直接检测粪便中CD种特异性tpi基因,对tpi基因阳性的粪便标本富集芽孢后,采用厌氧培养法用CCFA培养基进行CD的分离培养,然后PCR鉴定可疑菌株的CD种特异性tpi基因;采用Etest法测定CD对常用抗菌药物的MIC值并判定菌株对这些药物的敏感性;对耐药菌株,通过PCR和基因测序方法检测相关的耐药基因如克林霉素耐药相关基因erm B及喹诺酮类耐药主要相关DNA旋转酶基因gyr A和gyr B的突变情况。结果 467份粪便标本共检测出tpi阳性标本29份,从中共培养出22株CD。药敏结果显示,所有菌株对甲硝唑、万古霉素、阿莫西林/克拉维酸、哌拉西林、哌拉西林/他唑巴坦均敏感,未检测到对上述5种抗菌药物耐药和中介的菌株。测试菌对克林霉素、青霉素、莫西沙星的耐药率分别是90.9%(20/22)、27.3%(6/22)和13.6%(3/22)。所有耐药菌株中,有2株同时对克林霉素、莫西沙星、青霉素耐药。20株对克林霉素耐药的CD中,有40%(8/20)的菌株erm B基因阳性,3株莫西沙星耐药菌株中均检出gyr A、gyr B基因发生突变。结论广州地区CD对临床常用抗菌药物耐药率不高,但对克林霉素有较高的耐药率,erm B基因的存在是CD对克林霉素耐药的原因之一,而gyr A、gyr B基因的突变与CD对喹诺酮类耐药有关。另外,已出现同时耐3种抗菌药物的多重耐药CD菌株。