【摘 要】
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目的: 检测β-酪蛋白基因5′侧序列的启动BglⅡ效果及构建真核表达载体pcDNA3.1-65.方法: 采用SalⅠ和BamHⅠ对pMD-T/65双酶切,得到6465 bp的β-酪蛋白基因5′侧序列;将启动
【机 构】
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西北农林科技大学陕西省干细胞工程技术研究中心,第四军医大学基础部生物化学与分子生物学教研室
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目的: 检测β-酪蛋白基因5′侧序列的启动BglⅡ效果及构建真核表达载体pcDNA3.1-65.方法: 采用SalⅠ和BamHⅠ对pMD-T/65双酶切,得到6465 bp的β-酪蛋白基因5′侧序列;将启动子片段插入到XhoⅠ和BglⅡ双酶切后的pGL3-Basic载体里;获得重组报告基因载体pGL3-B65.瞬时转染西农萨能奶山羊原代培养的乳腺上皮细胞,检测β-酪蛋白基因5′侧序列的启动效果.将β-酪蛋白基因5′侧序列插入真核表达载体pcDNA3.1(-)的XhoⅠ和BamHⅠ位点之间,从而获得载体pc
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