【摘 要】
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目的:探索LINC AC004463.6通过PI3K/AKT/BCL-2通路对肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)细胞生物学行为的影响.方法:运用细胞转染技术构建细胞系,实时荧光定量PCR验证,运用CCK8法、Transwell实验、EdU实验和流式细胞仪检测凋亡技术观察细胞功能学变化,运用Western blotting和ELISA技术探索其可能作用机制.结果:LINC AC004463.6在HCC中异常上调,在HCC细胞系和L02细胞中均检测到LINC AC004463
【机 构】
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南通大学第二附属医院 南通市第一人民医院肝胆外科,江苏 南通 226001
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目的:探索LINC AC004463.6通过PI3K/AKT/BCL-2通路对肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)细胞生物学行为的影响.方法:运用细胞转染技术构建细胞系,实时荧光定量PCR验证,运用CCK8法、Transwell实验、EdU实验和流式细胞仪检测凋亡技术观察细胞功能学变化,运用Western blotting和ELISA技术探索其可能作用机制.结果:LINC AC004463.6在HCC中异常上调,在HCC细胞系和L02细胞中均检测到LINC AC004463.6的水平.选取SMCC7721和QGY7701作为LINC AC004463.6高表达细胞.CCK8和EdU实验结果表明,LINC AC004463.6表达降低显著抑制了SMCC7721和QGY7701细胞的增殖.而LINC AC004463.6基因敲除细胞中过表达LINC AC004463.6可使细胞增殖恢复和增强.Transwell实验检测表明shRNA处理的SMCC7721和QGY7701细胞侵袭性显著降低;经Lv-Rescue质粒处理后,细胞侵袭恢复并增强.LINC AC004463.6表达降低的细胞凋亡水平较高;LINC AC004463.6基因在LINC AC004463.6基因敲低的细胞中过表达后,细胞的凋亡水平有所恢复.Western blotting和ELISA检测提示shRNA组细胞BCL-2蛋白表达水平明显下调,同时PI3 K和AKT蛋白表达水平明显下降;与此相反BAX蛋白表达水平升高.结论:LINC AC004463.6可能通过PI3K/AKT/BCL-2通路改变肿瘤细胞的生物学行为.LINC AC004463.6可能是诊断HCC的一个前瞻性生物标志物.
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