【摘 要】
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目的构建 EBA- 175Ⅱ区 F2结构域基因的原核表达载体. 方法采用 PCR的方法从恶性疟原虫基因组 DNA中扩增出 EBA- 175Ⅱ区 F2结构域 856～ 1848 bp基因,定向克隆入 PMD18- T质粒
【机 构】
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南方医科大学热带病研究室,南方医科大学热带病研究室,南方医科大学中医系
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目的构建 EBA- 175Ⅱ区 F2结构域基因的原核表达载体. 方法采用 PCR的方法从恶性疟原虫基因组 DNA中扩增出 EBA- 175Ⅱ区 F2结构域 856～ 1848 bp基因,定向克隆入 PMD18- T质粒,再经 BamHⅠ和 XhoⅠ酶切亚克隆入高效表达载体 pET23a(+ ).重组质粒经 PCR、酶切、测序鉴定后,在 BL21( DE3)菌株中进行 IPTG诱导表达.结果重组质粒经序列测定证实插入基因为目的基因,符合表达框架,经 IPTG诱导,在 BL21( DE3)菌株中以非融合蛋白形
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