【摘 要】
：
目的:研究稳定干扰NOR1基因对官颈癌HeLa细胞系的影响.方法:采用pSUPER.neo+GFP载体构建靶向NOR1基因的shRNA干扰载体pSUPER-shNOR1-1,pSUPER-shNOR1-2以及无关序列对照载体p
【机 构】
：
中南大学湘雅二医院皮肤科,长沙,410011湖南省肿瘤医院/中南大学湘雅医学院附属肿瘤医院中心实验室,长沙410078;中南大学肿瘤研究所,长沙410078;中南大学湘雅医院皮肤科,长沙,410008
论文部分内容阅读
目的:研究稳定干扰NOR1基因对官颈癌HeLa细胞系的影响.方法:采用pSUPER.neo+GFP载体构建靶向NOR1基因的shRNA干扰载体pSUPER-shNOR1-1,pSUPER-shNOR1-2以及无关序列对照载体pSUPER-scramble,通过脂质体转染HeLa细胞,经G418筛选获得稳定干扰细胞系.采用RT-PCR和Western印迹检测NOR1 mRNA和蛋白表达水平.采用MTT法测定细胞生长曲线.采用H2O2处理HeLa细胞,采用Hoechst33258染色和TUNEL法测定细胞凋亡.Western印迹检测干扰NOR1对HeLa细胞凋亡相关分子Bcl-2,caspase和聚ADP核糖聚合酶(poly ADP-ribose polymerase,PARP)表达的影响.结果:稳定感染的shRNA干扰载体pSUPER-shNOR1-1和pSUPER-shNOR1-2抑制了HeLa细胞内源性NOR1的基因表达,成功构建了稳定干扰NORI基因的HeLa细胞系.MTT生长曲线测定表明:与pSUPER-scramble质粒转染细胞相比,稳定转染pSUPER-shNOR1-1和pSUPER-shNOR1-2质粒促进了HeLa细胞的活力和增殖,并抑制了H2O2诱导的HeLa细胞凋亡.Western印迹检测发现稳定干扰NOR1抑制了H2O2诱导的HeLa细胞caspase 9和PARP的活化,上调了Bcl-2蛋白的表达.结论:稳定干扰NOR1基因促进了HeLa细胞的活力与生长,并抑制了H2O2诱导的细胞凋亡,其机制与干扰NOR1表达引起抗凋亡分子Bcl-2表达增加和抑制caspase 9活化有关.
其他文献
笔者在植物油中加入无机铅标准溶液和具有一定比例的混合有机溶剂组成的均相体系,建立了植物油中痕量铅的石墨炉原子吸收直接测定法。AA240DUO原子吸收光谱仪(美国安捷伦公司
为探究吕家坨井田地质构造格局,根据钻孔勘探资料,采用分形理论和趋势面分析方法,研究了井田7
由广东省立中山图书馆领衔开发的“联合参考咨询网”是国内图书馆开展数字参考服务的著名品牌。根据“联合参考咨询网”用户的注册信息了解现有用户群的年龄状况、文化水平、
为探究吕家坨井田地质构造格局,根据钻孔勘探资料,采用分形理论和趋势面分析方法,研究了井田7
未来五年是我国经济发展的重要战略机遇期,正面临着产业结构优化和升级,在这种大的背景,成人教育如何适应产业结构升级带来的变化,各高校如何通过成人教育发展策略的调整,以
21世纪将是高科技的世纪，21世纪的语言教学将会更多地依赖于技术媒体。随着现代科学技术、现代外语教学理论和教学实践的发展，多媒体这一新的教学手段越来越频繁地被应用于课堂教学中。针对当前的形势和英语本学科的特点，并结合自己的教学实践，本人拟就多媒体在英语课堂教学中的运用谈几点看法。 一、多媒体与外语教学结合的必要性 外语教学是一个系统而复杂的过程，在这个过程中，教学方法和教学手段非常重要
一、“任务驱动”教学模式的涵义和基本特征 (一)“任务驱动”教学模式的涵义。所谓“任务驱动”就是在教学过程中，学生在教师的引导下，以一项共同的任务活动为目标，在实现目标强烈愿望的驱动下，积极主动地应用学习资源，通过自主探索或互动协作，最终完成既定任务，培育学生自学和独立解决问题的能力。 (二)“任务驱动”教学模式的基本特征。一是任务的现实性。“任务驱动”是一种建立在建构主义教学理论基础上的
目的了解中原地区农民居住以及生活环境条件,为环境综合治理提供依据。方法于2010—2011年对中原地区3省7个县区560户农村家庭采用现场观察和入户调查的方式,调查垃圾、污水
“形势与政策”教育是高校思想政治教育的重要内容,是每个学生的必修课程,承载着对大学生进行马克思主义形势观、政策观教育的特殊使命。“形势与政策”教育是高校思想政治理论课中最具特殊性的课程,既是严格的教学活动,又是日常的思想政治教育活动,其教学对象广、时间长、课时分散,具有时效性、现实性、实践性和动态性等特点。为了保证“形势与政策”教育教学的有效性,高校必须针对这些特点,建立灵活的管理机制,促进管理工
为探究吕家坨井田地质构造格局,根据钻孔勘探资料,采用分形理论和趋势面分析方法,研究了井田7