HCV包膜糖蛋白E2基因的克隆、蛋白表达及纯化

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目的:获得大量重HCVE2蛋白,为研究E2蛋白的功能及制备其抗体奠定基础.方法:利用PCR方法从HCV基因组序列中扩增出831bp(384—661aa)的E2基因片段并按读框克隆到原核表达载体pET32a(+)上,得到重组质粒pET32a—HCVE2,转化大肠杆菌BL-21(DE3)菌株,IPTG诱导HCVE2蛋白表达,SDS—PAGE和Western blot检测蛋白表达,Ni—NTA偶联的琼脂糖黏附柱纯化融合蛋白.结果:经IPTG诱导后,可见分子量约55000的融合蛋白表达;表达的蛋白主要以包涵体形式
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