人组织型谷氨酰胺转氨酶基因的克隆 表达及纯化

来源 :长治医学院学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yaoyao0313
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目的:克隆人组织型谷氨酰胺转氨酶基因,并进行原核表达及纯化。方法:从Caco-2细胞中提取总RNA,利用RT-PCR克隆人组织型谷氨酰胺转氨酶基因,然后将其连接到原核表达载体pET-32a。将构建成功的重组表达载体pET-32a-TG2导入大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达His-TG2融合蛋白。用Ni-NTA蛋白纯化柱对融合蛋白进行纯化,采用Western Blotting检测重组蛋白的特异性。结果:成功克隆出人组织型谷氨酰胺转氨酶基因,构建了pET-32a-TG2原核表达载体,并成功诱导了重
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