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目的
探讨血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)对骨髓间充质干细胞(BMSCs)向角质细胞分化的影响及其信号机制。
方法分离培养正常Wistar大鼠BMSCs,流式细胞仪检测BMSCs表面抗原的表达;酶联免疫吸附试验法测定BMSCs中AngⅡ分泌浓度;免疫细胞化学法测定成角质诱导后BMSCs中角蛋白10(K10)的表达。流式细胞仪法检测AngⅡ、AngⅡ1型受体(AT1)阻滞剂Losartan、AngⅡ2型受体(AT2)阻滞剂PD123319及其下游信号分子阻滞剂对BMSCs成角质诱导后K10阳性细胞数的影响。
结果流式细胞仪检测BMSCs表面标志CD29和CD90阳性表达率均在99%及以上,CD34、CD45阳性表达率均低于2%。AngⅡ在细胞上清液中的浓度随培养时间增加呈递增趋势(P< 0. 05)。流式细胞仪检测添加AngⅡ的成角质诱导组中BMSCs的K10阳性百分率在7 d 和14 d分别为69. 02%和82. 10%,明显高于对照组(P< 0. 05)。而添加Losartan及下游信号分子阻滞剂SB203580、AG490、SP600125后,K10阳性细胞数减少(P< 0. 05)。
结论AngⅡ可显著提高BMSCs向角质细胞的转化率,p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)、酪氨酸激酶2/3(JAK2/3)、c-jun氨基端激酶(JNK)信号通路与AngⅡ介导的作用密切相关。AngⅡ促进BMSCs向角质细胞转化可能是其促进创面上皮化的机制之一。