【摘 要】
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研究siRNA对乳腺癌MCF-7细胞株cyclinE表达的抑制及对细胞生长的影响。化学合成针对cyclinE基因的小干扰RNA(siRNA),转染MCF-7细胞株;分别应用荧光定量PCR和免疫印迹测定cycl
【机 构】
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浙江大学细胞生物学研究所,乐清市第二人民医院
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研究siRNA对乳腺癌MCF-7细胞株cyclinE表达的抑制及对细胞生长的影响。化学合成针对cyclinE基因的小干扰RNA(siRNA),转染MCF-7细胞株;分别应用荧光定量PCR和免疫印迹测定cyclinEmRNA和蛋白质的表达,CCK-8测定细胞的增殖活性,流式细胞仪检测细胞周期,软琼脂培养检测细胞克隆形成能力。10、50、100nmol/LsiRNA-cyclinE分别使MCF-7细胞cyclinE基因表达降低了24.7%、62.5%和71.0%,蛋白质表达降低了40.8%、66.5%和71.3%。转染siRNA-cyclinE后,G1期细胞增多,S期减少,增殖受到抑制,软琼脂克隆形成率降低。结果提示,在MCF-7细胞株中,导入针对cyclinE的siRNA,可有效抑制cyclinE的表达,进而使细胞增殖减缓,逆转其恶性表型。
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