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【目的】建立悬铃叶苎麻植物AFLP反应体系，为其无融合生殖的分子标记及构建遗传图谱提供技术支持。【方法】以悬铃叶苎麻叶片为材料，采用改良CTAB法提取基因组DNA，并对酶切与连接体系、预扩和选扩程序进行探索，建立一套优化的AFLP反应体系。【结果】通过对EcoRⅠ＋NNN／MseⅠ＋NNN的64对引物组合的筛选，获得了清晰的选择性扩增图谱和多态性较高的引物组合。【结论】经多次重复验证，建立的优化体系可用于悬铃叶苎麻的AFLP分析。