【摘 要】
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为筛选胰高血糖素受体拮抗剂,建立了一种高通量筛选胰高血糖素受体拮抗剂的细胞模型.利用PCR方法扩增得到人的胰高血糖素受体cDNA,并连接到哺乳动物细胞表达载体pCDNA3.1上,
【机 构】
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华东师范大学生命科学学院上海市脑功能基因组学重点实验室
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为筛选胰高血糖素受体拮抗剂,建立了一种高通量筛选胰高血糖素受体拮抗剂的细胞模型.利用PCR方法扩增得到人的胰高血糖素受体cDNA,并连接到哺乳动物细胞表达载体pCDNA3.1上,构成质粒h glucagons-R/pCDNA3.1,将这种质粒与报告基因质粒(3×CRE/3×MRE/SRE-LUC)共转染到HEK293细胞,通过G418筛选,建立稳定的人胰高血糖素受体拮抗剂筛选细胞株.利用胰高血糖素受体内源激动剂探索和优化了筛选条件,筛选方法合理,Z′因子大于0.6,系统稳定,符合胰高血糖素受体拮抗剂的高通量筛选的要求.
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