铁皮石斛DoSAMDC-like基因的克隆及原核表达

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本研究从药用植物铁皮石斛中克隆得到S-腺苷甲硫氨酸脱羧酶(S-adenosyl-L-methionine decarboxylase)基因(DoSA MDC-like)并进行序列分析和原核表达.SAMDC基因家族具有多个成员,本研究采用同源克隆的方法对铁皮石斛中尚未报道的新成员DoSAMDC-like基因进行克隆,并与拟南芥SAMDC基因家族成员和铁皮石斛基因组注释序列进行比对分析、蛋白质特征及原核表达等分析.基因序列分析表明,DoSA MDC-like基因编码区全长1 104 bp,推测编码368个氨基酸,氨基酸序列具有SAM decarbox超家族共同的保守结构域.多序列比对及进化树结果表明,克隆获得的DoSAMDC-like基因序列对应于基因组测序注释的XM 020825443.2序列,一致性为99.55%,与铁皮石斛SAMDC1基因一致性为80.16%.异源表达结果表明,DoSAMDC-like基因受IPTG诱导,蛋白分子量约为47 kD.DoSA MDC-like基因的克隆和原核表达,可为参与铁皮石斛多胺代谢、生物碱合成相关基因的蛋白质生化活性等研究提供了帮助.
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