【摘 要】
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通过三步亚克隆，将单点突变葡萄糖异构酶（ＧＩＧ１３８Ｐ）基因及其调控序列插入链霉菌质粒ｐＩＪ４０８３，构建重组表达质粒ｐＩＪ４０８３－ＧＩ１。用重组质粒转化变铅青链霉菌ＴＫ５４原生质体，经硫链丝菌素抗性（Ｔｈ＾Ｒ）筛选，获得重组菌株ＴＫ５４／ｐＩＪ４０８３－ＧＩ１。酶活力测
【机 构】
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中国科学技术大学生命科学学院分子生物学与细胞生物学系,中国科学技术大学生命科学学院分子生物学与细胞生物
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通过三步亚克隆，将单点突变葡萄糖异构酶（ＧＩＧ１３８Ｐ）基因及其调控序列插入链霉菌质粒ｐＩＪ４０８３，构建重组表达质粒ｐＩＪ４０８３－ＧＩ１。用重组质粒转化变铅青链霉菌ＴＫ５４原生质体，经硫链丝菌素抗性（Ｔｈ＾Ｒ）筛选，获得重组菌株ＴＫ５４／ｐＩＪ４０８３－ＧＩ１。酶活力测定和ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析表明，ＧＩＧ１３８Ｐ基因在变铅青链霉菌中得到高效表达，ＧＩ１粗酶液比活力为１５Ｕ／ｍｇ，ＧＩ１表达量约
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