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目的
探索跨膜丝氨酸蛋白酶4(TMPRSS4)对肝癌血管生成的影响及机制。
方法转染慢病毒载体构建TMPRSS4稳定过表达的人肝癌HuH-7细胞株，运用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)、蛋白免疫印迹法(Western blot)检测其表达量。Matrigel胶成管实验检测各组肿瘤细胞上清液对人脐静脉细胞融合细胞株EA.hy926细胞血管拟态形成的影响。接种肿瘤细胞于裸鼠皮下成瘤，免疫组化标记TMPRSS4、CD34验证TMPRSS4对肝细胞癌血管生成的影响。qRT-PCR检测血管内皮生长因子(VEGF)以明确诱导肿瘤血管生成的机制。
结果qRT-PCR、Western blot结果显示转染TMPRSS4慢病毒的HuH-7细胞株，其TMPRSS4表达较对照组显著上调。Matrigel胶成管实验结果显示过表达TMPRSS4的细胞上清液使人脐静脉内皮血管细胞血管拟态形成能力显著增强。免疫组化标记TMPRSS4、CD34结果显示，TMPRSS4阳性表达的肿瘤组织微血管密度显著高于对照组。qRT-PCR结果显示过表达TMPRSS4的肝癌细胞VEGF水平显著高于对照组。
结论TMPRSS4可通过上调VEGF的表达促进肝癌血管生成。