【摘 要】
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目的 探讨维生素D3处理后Toll样受体2(TLR2)信号、微小RNA-146a-5p(miR-146a-5p)表达改变对孕鼠流产率的影响.方法 通过子宫腔注射人β2糖蛋白1(β2-GP1)进行自身免疫型自然流产模型的构建.将20只自身免疫型自然流产模型孕鼠随机分为模型组(n=10,妊娠第1天给予蒸馏水0.1 mL/10 g,灌胃,每日1次,连续14 d)和实验组[n=10,妊娠第1天给予25μg·mL-11,25-(OH)2D30.16 mL,腹腔注射];正常组为10只已受孕的正常小鼠.计算3组小鼠的胚
【机 构】
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福建医科大学 附属第一医院 妇产科,福建 福州350005
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目的 探讨维生素D3处理后Toll样受体2(TLR2)信号、微小RNA-146a-5p(miR-146a-5p)表达改变对孕鼠流产率的影响.方法 通过子宫腔注射人β2糖蛋白1(β2-GP1)进行自身免疫型自然流产模型的构建.将20只自身免疫型自然流产模型孕鼠随机分为模型组(n=10,妊娠第1天给予蒸馏水0.1 mL/10 g,灌胃,每日1次,连续14 d)和实验组[n=10,妊娠第1天给予25μg·mL-11,25-(OH)2D30.16 mL,腹腔注射];正常组为10只已受孕的正常小鼠.计算3组小鼠的胚胎丢失率,以酶联免疫吸附(ELISA)检测3组血清中抗心磷脂抗体(ACA)抗体,β2糖蛋白1(β2-GP1)抗体;荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测各组胎盘miR-146a-5p、β2-GP1、TLR-2、衔接蛋白髓样分化因子(MYD88)、泛素连接酶-肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF6)、募集白细胞介素1受体相关蛋白激酶(IRAK1)表达结果;以蛋白质印迹(Western blot)法检测各组胎盘TLR-2、MYD88、TRAF6、IRAK1、β2-GPI蛋白表达.结果 模型组的胚胎丢失率(32.95％)高于正常组(6.32％)和实验组(13.64％)(均P<0.05).正常组、模型组和实验组血清ACA抗体含量分别为(84.15±7.91),(101.32±5.51),(89.71±4.34)ng·mL-1;β2-GP1抗体含量分别为(245.34±33.48),(341.92±23.67),(305.16±26.35)ng·mL-1.模型组血清中ACA、β2-GP1含量较正常组升高(P<0.05),实验组血清中ACA、β2-GP1含量相对模型组下降(P<0.05).与正常组相比,模型组miR-146a-5p mRNA水平明显高于正常组,β2-GP1、TRAF6、IRAK1、MYD88 mRNA水平均明显低于正常组(均P<0.05);实验组miR-146a-5p mRNA水平明显低于模型组,β2-GP1、TRAF6、IRAK1、MYD88 mRNA水平明显高于模型组(P<0.05);模型组β2-GP1、TLR2、MYD88、TRAF6、IRAK1蛋白水平明显高于正常组;实验组的β2-GP1、TLR-2、MYD88、TRAF6、IRAK1蛋白水平明显低于模型组(P<0.05).结论 miR-146a的高表达可能调控TLRs信号通路的过度激活,可能在自身免疫型自然流产中发挥重要作用,VitD3可能通过调节miR-146a的表达抑制TLRs-MYD88信号通路的表达,有效地降低流产率.
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