【摘 要】
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为实现硫酸软骨素酶AC(chondroitinase AC,ChonAC)在大肠杆菌中高效表达,通过PCR方法从肝素黄杆菌(Pedobacter heparinus)中扩增得到ChonAC基因cslA,采用融合蛋白技术构建麦芽糖
【机 构】
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清华大学化学工程系工业生物催化教育部重点实验室,北京电子科技职业学院生物技术系
【基金项目】
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国家“863”计划项目(2012AA022201),北京市属高等学校人才强教计划项目(PHR201107151),北京电子科技职业学院院内重点课题(YZKB2011003),北京市属高等学校人才强教深化计划资助项目
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为实现硫酸软骨素酶AC(chondroitinase AC,ChonAC)在大肠杆菌中高效表达,通过PCR方法从肝素黄杆菌(Pedobacter heparinus)中扩增得到ChonAC基因cslA,采用融合蛋白技术构建麦芽糖结合蛋白(maltose-bindingprotein,MBP)与ChonAC的融合表达载体(MBP-ChonAC),并在低温(15℃)条件下实现MBP-ChonAC的可溶活性表达,通过MBPTrap HP可实现一步纯化,使纯度可达95%以上,酶比活力可达94.1IU/mg融合蛋白
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